Przejdź do treści
H4-II-E-C3
Chusteczka
Wątroba
Choroba
Rak wątrobowokomórkowy
Synonimy
H4IIEC3, H4-IIE-C3, H4-II-EC3, H-II-E-C3

Dokumenty

H4-II-E-C3

Cell line · Numer produktu 305336

The H4-II-E-C3 cell line is a well-established rat hepatoma cell line derived from liver carcinoma. This line is widely used in research focused on liver-...

€550.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa H4-II-E-C3 to dobrze znana linia komórkowa wątrobiaka szczura, wyhodowana z raka wątroby. Linia ta jest szeroko stosowana w badaniach dotyczących funkcji specyficznych dla wątroby oraz procesów metabolicznych zachodzących w hepatocytach. Jedną z istotnych cech komórek H4-II-E-C3 jest wysoka ekspresja transportera glutaminianu o wysokim powinowactwie GLT-1A. Cecha ta odróżnia je od prawidłowych hepatocytów szczurzych, które nie wykazują znaczącego poziomu tego transportera. Ekspresja GLT-1A w komórkach H4-II-E-C3 umożliwia skuteczne badanie metabolizmu i transportu glutaminianu, dostarczając informacji na temat transformacji komórek wątroby oraz metabolizmu komórek nowotworowych.

Ponadto komórki H4-II-E-C3 są wykorzystywane do badania metabolizmu aldehydów, a w szczególności aktywności mitochondrialnej dehydrogenazy aldehydowej klasy 2 (ALDH2). Enzym ten odgrywa kluczową rolę w metabolizmie acetaldehydu powstającego podczas utleniania etanolu, dzięki czemu ta linia komórkowa nadaje się do badań nad metabolizmem alkoholu i jego skutkami komórkowymi. Zastosowanie w tych komórkach techniki „acetaldehydowego clampu” umożliwiło precyzyjny pomiar aktywności ALDH2 bez konieczności izolacji mitochondriów, ułatwiając badanie kinetyki enzymu oraz wpływu różnych inhibitorów na detoksykację aldehydów.

Chusteczka
Wątroba
Choroba
Rak wątrobowokomórkowy
Synonimy
  • H4IIEC3
  • H4-IIE-C3
  • H4-II-EC3
  • H-II-E-C3

02Klasyfikacja

Organizm
Szczur
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
GMO-S1
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S1: This rat hepatocellular carcinoma cell line (H4-II-E-C3) contains undefined modifications classified as GMO, stably present in the transformed hepatic cell line. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Nowotworotwórczy
Tak, u szczurów AxC

04Identyfikatory

Źródło
H4-II-E-C3 (numer katalogowy Cytion 305336)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0285

05Ekspresja i podatność

Ekspresja białek
Ekspresja genów: aminotransferaza tyrozynowa, albumina, transferyna, protrombina

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1–3 × 10⁴/cm²
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Rasa / podgatunek
AxC
Wiek dawcy
Nieokreślony