Μετάβαση στο περιεχόμενο
H4-II-E-C3
Ιστός
Ήπαρ
Ασθένεια
Ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα
Συνώνυμα
H4IIEC3, H4-IIE-C3, H4-II-EC3, H-II-E-C3

Έγγραφα

H4-II-E-C3

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305336

The H4-II-E-C3 cell line is a well-established rat hepatoma cell line derived from liver carcinoma. This line is widely used in research focused on liver-...

€550.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά H4-II-E-C3 είναι μια καθιερωμένη κυτταρική σειρά ηπατώματος αρουραίου που προέρχεται από καρκίνωμα του ήπατος. Η σειρά αυτή χρησιμοποιείται ευρέως στην έρευνα που εστιάζει στις ειδικές για το ήπαρ λειτουργίες και στις μεταβολικές διεργασίες που λαμβάνουν χώρα εντός των ηπατοκυττάρων. Ένα αξιοσημείωτο χαρακτηριστικό των κυττάρων H4-II-E-C3 είναι η υψηλή έκφραση του μεταφορέα γλουταμινικού υψηλής συγγένειας GLT-1A. Το χαρακτηριστικό αυτό τα διακρίνει από τα φυσιολογικά ηπατοκύτταρα αρουραίου, τα οποία δεν παρουσιάζουν σημαντικά επίπεδα αυτού του μεταφορέα. Η έκφραση του GLT-1A στα κύτταρα H4-II-E-C3 επιτρέπει την αποτελεσματική μελέτη του μεταβολισμού και της μεταφοράς του γλουταμινικού, παρέχοντας πληροφορίες σχετικά με τη μεταμόρφωση των ηπατικών κυττάρων και τον μεταβολισμό των καρκινικών κυττάρων.

Επιπλέον, τα κύτταρα H4-II-E-C3 χρησιμοποιούνται για τη μελέτη του μεταβολισμού των αλδεϋδών, ιδίως της δραστηριότητας της μιτοχονδριακής αλδεϋδοδεϋδρογενάσης κλάσης 2 (ALDH2). Το ένζυμο αυτό είναι κρίσιμο για τον μεταβολισμό της ακεταλδεΰδης που παράγεται κατά την οξείδωση της αιθανόλης, καθιστώντας αυτή τη κυτταρική σειρά κατάλληλη για έρευνα σχετικά με τον μεταβολισμό του αλκοόλ και τις κυτταρικές επιδράσεις του. Η χρήση της τεχνικής «acetaldehyde clamp» σε αυτά τα κύτταρα έχει επιτρέψει την ακριβή μέτρηση της δραστηριότητας της ALDH2 χωρίς την ανάγκη απομόνωσης των μιτοχονδρίων, διευκολύνοντας τη μελέτη της κινητικής του ενζύμου και της επίδρασης διαφόρων αναστολέων στην αποτοξίνωση των αλδεϋδών.

Ιστός
Ήπαρ
Ασθένεια
Ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα
Συνώνυμα
  • H4IIEC3
  • H4-IIE-C3
  • H4-II-EC3
  • H-II-E-C3

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Αρουραίος
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
GMO-S1
Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
GMO-S1: This rat hepatocellular carcinoma cell line (H4-II-E-C3) contains undefined modifications classified as GMO, stably present in the transformed hepatic cell line. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Ογκογόνος
Ναι, σε αρουραίους AxC

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
H4-II-E-C3 (αριθμός καταλόγου Cytion 305336)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10116
Κελλοσαύρος
CVCL_0285

05Έκφραση και ευαισθησία

Έκφραση πρωτεϊνών
Γονιδιακή έκφραση: τυροσίνη αμινοτρανσφεράση, αλβουμίνη, τρανσφερίνη, προθρομβίνη

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
1-3*10⁴/cm²
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Φυλή / υποείδος
AxC
Ηλικία δωρητή
Απροσδιόριστο