Gå til innholdet
H4-II-E-C3
Vev
Lever
Sykdom
Hepatocellulært karsinom
Synonymer
H4IIEC3, H4-IIE-C3, H4-II-EC3, H-II-E-C3

Dokumenter

H4-II-E-C3

Cell line · Produktnummer 305336

The H4-II-E-C3 cell line is a well-established rat hepatoma cell line derived from liver carcinoma. This line is widely used in research focused on liver-...

€550.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

H4-II-E-C3-cellelinjen er en veletablert hepatomcellelinje fra rotte, avledet fra leverkarsinom. Denne cellelinjen brukes i stor utstrekning i forskning som fokuserer på leverspesifikke funksjoner og de metabolske prosessene som foregår i hepatocytter. Et bemerkelsesverdig trekk ved H4-II-E-C3-cellene er deres høye uttrykk av glutamattransportøren GLT-1A med høy affinitet. Dette kjennetegnet skiller dem fra normale hepatocytter fra rotte, som ikke viser signifikante nivåer av denne transportøren. Ekspresjonen av GLT-1A i H4-II-E-C3-celler muliggjør effektiv undersøkelse av glutamatmetabolisme og -transport, noe som gir innsikt i levercellers transformasjon og tumorcellers metabolisme.

I tillegg brukes H4-II-E-C3-celler til å studere aldehydmetabolismen, særlig aktiviteten til mitokondriell klasse 2-aldehyddehydrogenase (ALDH2). Dette enzymet er avgjørende for metaboliseringen av acetaldehyd som produseres under etanoloxidasjon, noe som gjør denne cellelinjen egnet for forskning på alkoholmetabolisme og dens cellulære effekter. Bruken av en «acetaldehyd-clamp»-teknikk i disse cellene har gjort det mulig å foreta presise målinger av ALDH2-aktiviteten uten behov for isolering av mitokondrier, noe som letter studiet av enzymkinetikk og virkningen av ulike hemmere på aldehydavgiftning.

Vev
Lever
Sykdom
Hepatocellulært karsinom
Synonymer
  • H4IIEC3
  • H4-IIE-C3
  • H4-II-EC3
  • H-II-E-C3

02Klassifisering

Organisme
Rotte
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This rat hepatocellular carcinoma cell line (H4-II-E-C3) contains undefined modifications classified as GMO, stably present in the transformed hepatic cell line. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Tumorinduserende
Ja, hos AxC-rotter

04Identifikatorer

Kildehenvisning
H4-II-E-C3 (Cytion-katalognummer 305336)
NCBI-skattenummer
10116
Cellosaurus
CVCL_0285

05Uttrykk og mottakelighet

Proteinekspresjon
Genuttrykk: tyrosinaminotransferase, albumin, transferrin, protrombin

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1–3 × 10⁴/cm²
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Rase / underart
AxC
Donorens alder
Uspesifisert