Pereiti prie turinio
H4-II-E-C3
Audinys
Kepenys
Liga
Hepatocelulinė karcinoma
Sinonimai
H4IIEC3, H4-IIE-C3, H4-II-EC3, H-II-E-C3

Dokumentai

H4-II-E-C3

Cell line · Prekės numeris 305336

The H4-II-E-C3 cell line is a well-established rat hepatoma cell line derived from liver carcinoma. This line is widely used in research focused on liver-...

€550.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

H4-II-E-C3 ląstelių linija yra gerai žinoma žiurkių hepatomos ląstelių linija, išskirta iš kepenų karcinomos. Ši linija plačiai naudojama tyrimuose, skirtuose kepenims būdingoms funkcijoms ir metaboliniams procesams, vykstantiems hepatocituose. Vienas iš svarbiausių H4-II-E-C3 ląstelių bruožų yra didelė didelio afiniteto glutamato transporterio GLT-1A ekspresija. Ši savybė jas išskiria iš normalių žiurkių hepatocitų, kuriuose šio transporterio lygis nėra reikšmingas. GLT-1A ekspresija H4-II-E-C3 ląstelėse leidžia veiksmingai tirti glutamato metabolizmą ir transportą, suteikdama įžvalgų apie kepenų ląstelių transformaciją ir navikinių ląstelių metabolizmą.

Be to, H4-II-E-C3 ląstelės naudojamos aldehidų metabolizmui tirti, ypač mitochondrinės 2 klasės aldehiddehidrogenazės (ALDH2) aktyvumui. Šis fermentas yra labai svarbus etanolio oksidacijos metu susidarančio acetaldehido metabolizmui, todėl ši ląstelių linija tinka alkoholio metabolizmo ir jo poveikio ląstelėms tyrimams. „Acetaldehido fiksavimo“ technikos taikymas šiose ląstelėse leidžia tiksliai išmatuoti ALDH2 aktyvumą be būtinybės izoliuoti mitochondrijas, o tai palengvina fermentų kinetikos tyrimus ir įvairių inhibitorių poveikio aldehido detoksikacijai analizę.

Audinys
Kepenys
Liga
Hepatocelulinė karcinoma
Sinonimai
  • H4IIEC3
  • H4-IIE-C3
  • H4-II-EC3
  • H-II-E-C3

02Klasifikacija

Organizmas
Žiurkė
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This rat hepatocellular carcinoma cell line (H4-II-E-C3) contains undefined modifications classified as GMO, stably present in the transformed hepatic cell line. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Tumorogeninis
Taip, AxC žiurkėse

04Identifikatoriai

Nuoroda
H4-II-E-C3 (Cytion katalogo numeris 305336)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10116
Cellosaurus
CVCL_0285

05Išraiška ir jautrumas

Baltojų baltymų ekspresija
Genų ekspresija: tirozino aminotransferazė, albuminas, transferinas, protrombinas

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1–3 × 10⁴/cm²
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Veislė / porūšis
AxC
Donoro amžius
Nenustatyta