H4-II-E-C3

A linhagem celular H4-II-E-C3 é uma linhagem bem estabelecida de hepatoma de rato, derivada de um carcinoma hepático. Essa linhagem é amplamente utilizada em pesquisas voltadas para funções específicas do fígado e para os processos metabólicos que ocorrem nos hepatócitos. Um aspecto notável das células H4-II-E-C3 é sua alta expressão do transportador de glutamato de alta afinidade GLT-1A. Essa característica as distingue dos hepatócitos normais de ratos, que não apresentam níveis significativos desse transportador. A expressão do GLT-1A nas células H4-II-E-C3 permite o estudo eficiente do metabolismo e do transporte do glutamato, proporcionando insights sobre a transformação das células hepáticas e o metabolismo das células tumorais.

Além disso, as células H4-II-E-C3 são utilizadas para estudar o metabolismo dos aldeídos, particularmente a atividade da aldeído desidrogenase mitocondrial de classe 2 (ALDH2). Essa enzima é fundamental para a metabolização do acetaldeído produzido durante a oxidação do etanol, tornando essa linhagem celular adequada para pesquisas sobre o metabolismo do álcool e seus efeitos celulares. O uso da técnica de “clamp de acetaldeído” nessas células permitiu a medição precisa da atividade da ALDH2 sem a necessidade de isolamento mitocondrial, facilitando o estudo da cinética enzimática e do impacto de vários inibidores na desintoxicação de aldeídos.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.