Tartalomra ugrás
H4-II-E-C3
Szövet
Máj
Betegség
Hepatocelluláris karcinóma
Szinonimák
H4IIEC3, H4-IIE-C3, H4-II-EC3, H-II-E-C3

Dokumentumok

H4-II-E-C3

Cell line · Termékszám 305336

The H4-II-E-C3 cell line is a well-established rat hepatoma cell line derived from liver carcinoma. This line is widely used in research focused on liver-...

€550.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A H4-II-E-C3 sejtvonal egy jól bevált, patkány májkarcinómából származó hepatoma sejtvonal. Ezt a sejtvonalat széles körben használják a májra jellemző funkciókra, valamint a májsejtekben lejátszódó anyagcsere-folyamatokra irányuló kutatásokban. A H4-II-E-C3 sejtek egyik figyelemre méltó tulajdonsága a nagy affinitású glutamát-transzporter, a GLT-1A magas expressziója. Ez a tulajdonság megkülönbözteti őket a normál patkány májsejtektől, amelyekben ez a transzporter nem fordul elő jelentős mennyiségben. A GLT-1A expressziója a H4-II-E-C3 sejtekben lehetővé teszi a glutamát-anyagcsere és -transzport hatékony vizsgálatát, így betekintést nyújt a májsejtek transzformációjába és a tumorsejtek anyagcseréjébe.

Ezen felül a H4-II-E-C3 sejteket az aldehid-anyagcsere, különösen a mitokondriális 2. osztályú aldehid-dehidrogenáz (ALDH2) aktivitásának vizsgálatára is használják. Ez az enzim kritikus szerepet játszik az etanol oxidációja során keletkező acetaldehid metabolizálásában, így ez a sejtvonal alkalmas az alkohol-anyagcsere és annak sejtszintű hatásainak kutatására. Az „acetaldehid-klamp” technika alkalmazása ezekben a sejtekben lehetővé tette az ALDH2-aktivitás pontos mérését a mitokondriumok izolálása nélkül, megkönnyítve az enzimkinetika, valamint a különböző inhibitorok aldehid-detoxikációra gyakorolt hatásának vizsgálatát.

Szövet
Máj
Betegség
Hepatocelluláris karcinóma
Szinonimák
  • H4IIEC3
  • H4-IIE-C3
  • H4-II-EC3
  • H-II-E-C3

02Osztályozás

Organizmus
Patkány
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This rat hepatocellular carcinoma cell line (H4-II-E-C3) contains undefined modifications classified as GMO, stably present in the transformed hepatic cell line. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Daganatképző
Igen, AxC-patkányokban

04Azonosítók

Hivatkozás
H4-II-E-C3 (Cytion katalógusszám: 305336)
NCBI adóazonosító szám
10116
Cellosaurus
CVCL_0285

05Kifejeződés és fogékonyság

Fehérjeexpresszió
Génkifejeződés: tirozin-aminotranszferáz, albumin, transzferrin, protrombin

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
1–3 × 10⁴/cm²
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Faj / alfaj
AxC
Az adományozó életkora
Meghatározatlan