Mine otse sisu juurde
H4-II-E-C3
Kude
Maksa
Haigus
Hepatotsellulaarne kartsinoom
Sünonüümid
H4IIEC3, H4-IIE-C3, H4-II-EC3, H-II-E-C3

Dokumendid

H4-II-E-C3

Cell line · Toote number 305336

The H4-II-E-C3 cell line is a well-established rat hepatoma cell line derived from liver carcinoma. This line is widely used in research focused on liver-...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

H4-II-E-C3 rakuliin on laialt tunnustatud rottide hepatoma rakuliin, mis on saadud maksakartsinoomist. Seda liini kasutatakse laialdaselt uuringutes, mis keskenduvad maksaspetsiifilistele funktsioonidele ja hepatotsüütides toimuvatele ainevahetusprotsessidele. H4-II-E-C3 rakkude üks märkimisväärne omadus on kõrge afiinsusega glutamaadi transpordija GLT-1A kõrge ekspressioon. See omadus eristab neid normaalsetest roti hepatotsüütidest, milles selle transpordija tasemed ei ole märkimisväärsed. GLT-1A ekspressioon H4-II-E-C3 rakkudes võimaldab tõhusalt uurida glutamaadi ainevahetust ja transporti, andes ülevaate maksarakkude transformatsioonist ja kasvajarakkude ainevahetusest.

Lisaks kasutatakse H4-II-E-C3 rakke aldehüüdi ainevahetuse uurimiseks, eriti mitokondriaalse 2. klassi aldehüüdi dehüdrogenaasi (ALDH2) aktiivsuse uurimiseks. See ensüüm on otsustava tähtsusega etanooli oksüdatsiooni käigus tekkiva atseetaldehüüdi ainevahetuses, mistõttu sobib see rakuliin alkoholi ainevahetuse ja selle rakuliste mõjude uurimiseks. „Atsetaldehüüdi klamber“-meetodi kasutamine nendes rakkudes on võimaldanud ALDH2 aktiivsuse täpset mõõtmist ilma mitokondrite eraldamiseta, hõlbustades ensüümi kineetika uurimist ja erinevate inhibiitorite mõju aldehüüdi detoksikatsioonile.

Kude
Maksa
Haigus
Hepatotsellulaarne kartsinoom
Sünonüümid
  • H4IIEC3
  • H4-IIE-C3
  • H4-II-EC3
  • H-II-E-C3

02Klassifikatsioon

Organism
Rott
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This rat hepatocellular carcinoma cell line (H4-II-E-C3) contains undefined modifications classified as GMO, stably present in the transformed hepatic cell line. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Tuumorigeenne
Jah, AxC-rottidel

04Tunnused

Viide
H4-II-E-C3 (Cytioni katalooginumber 305336)
NCBI maksukood
10116
Cellosaurus
CVCL_0285

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
Geenide ekspressioon: türosiini aminotransferaas, albumiin, transferriin, protrombiin

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1–3 × 10⁴/cm²
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
AxC
Doonori vanus
Täpsustamata