
- Kude
- Maksa
- Haigus
- Hepatotsellulaarne kartsinoom
- Sünonüümid
- H4IIEC3, H4-IIE-C3, H4-II-EC3, H-II-E-C3
Dokumendid
H4-II-E-C3
Cell line · Toote number 305336
The H4-II-E-C3 cell line is a well-established rat hepatoma cell line derived from liver carcinoma. This line is widely used in research focused on liver-...
Kohandamine / Soovitused
- H4-II-E-C3Cell line€550.00
Soovitatav (värskeim partii)
01Üldine teave
- Kirjeldus
H4-II-E-C3 rakuliin on laialt tunnustatud rottide hepatoma rakuliin, mis on saadud maksakartsinoomist. Seda liini kasutatakse laialdaselt uuringutes, mis keskenduvad maksaspetsiifilistele funktsioonidele ja hepatotsüütides toimuvatele ainevahetusprotsessidele. H4-II-E-C3 rakkude üks märkimisväärne omadus on kõrge afiinsusega glutamaadi transpordija GLT-1A kõrge ekspressioon. See omadus eristab neid normaalsetest roti hepatotsüütidest, milles selle transpordija tasemed ei ole märkimisväärsed. GLT-1A ekspressioon H4-II-E-C3 rakkudes võimaldab tõhusalt uurida glutamaadi ainevahetust ja transporti, andes ülevaate maksarakkude transformatsioonist ja kasvajarakkude ainevahetusest.
Lisaks kasutatakse H4-II-E-C3 rakke aldehüüdi ainevahetuse uurimiseks, eriti mitokondriaalse 2. klassi aldehüüdi dehüdrogenaasi (ALDH2) aktiivsuse uurimiseks. See ensüüm on otsustava tähtsusega etanooli oksüdatsiooni käigus tekkiva atseetaldehüüdi ainevahetuses, mistõttu sobib see rakuliin alkoholi ainevahetuse ja selle rakuliste mõjude uurimiseks. „Atsetaldehüüdi klamber“-meetodi kasutamine nendes rakkudes on võimaldanud ALDH2 aktiivsuse täpset mõõtmist ilma mitokondrite eraldamiseta, hõlbustades ensüümi kineetika uurimist ja erinevate inhibiitorite mõju aldehüüdi detoksikatsioonile.
- Kude
- Maksa
- Haigus
- Hepatotsellulaarne kartsinoom
- Sünonüümid
- H4IIEC3
- H4-IIE-C3
- H4-II-EC3
- H-II-E-C3
02Klassifikatsioon
- Organism
- Rott
- Sugu
- Mees
- Kasvuvõime
- Järgija
- GMO-staatus
- GMO-S1
- GMO-staatuse üksikasjad
- GMO-S1: This rat hepatocellular carcinoma cell line (H4-II-E-C3) contains undefined modifications classified as GMO, stably present in the transformed hepatic cell line. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioloogilise ohutuse tase
- 1
03Omadused
- Tuumorigeenne
- Jah, AxC-rottidel
04Tunnused
- Viide
- H4-II-E-C3 (Cytioni katalooginumber 305336)
- NCBI maksukood
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_0285
05Avaldumine ja vastuvõtlikkus
- Valgu ekspressioon
- Geenide ekspressioon: türosiini aminotransferaas, albumiin, transferriin, protrombiin
06Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendada söötme 10% FBS-ga
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
- Külvitihedus
- 1–3 × 10⁴/cm²
- Vedeliku vahetus
- 2 kuni 3 korda nädalas
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
08Annetaja
- Tõug / alamliik
- AxC
- Doonori vanus
- Täpsustamata
09Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Vajalik on materjalide üleandmise leping
- Jah