Pāriet uz saturu
H4-II-E-C3
Audums
Aknas
Slimība
Hepatocelulārā karcinoma
Sinonīmi
H4IIEC3, H4-IIE-C3, H4-II-EC3, H-II-E-C3

Dokumenti

H4-II-E-C3

Cell line · Preces numurs 305336

The H4-II-E-C3 cell line is a well-established rat hepatoma cell line derived from liver carcinoma. This line is widely used in research focused on liver-...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

H4-II-E-C3 šūnu līnija ir labi izpētīta žurku hepatomas šūnu līnija, kas iegūta no aknu karcinomas. Šo līniju plaši izmanto pētījumos, kas veltīti aknu specifiskajām funkcijām un metabolisma procesiem, kas norisinās hepatocītos. Viens no ievērojamiem H4-II-E-C3 šūnu aspektiem ir augsta afinitātes glutamāta transportētāja GLT-1A augsta ekspresija. Šī īpašība tās atšķir no normāliem žurku hepatocītiem, kuros šī transportētāja līmenis nav nozīmīgs. GLT-1A ekspresija H4-II-E-C3 šūnās ļauj efektīvi pētīt glutamāta metabolismu un transportu, sniedzot ieskatu aknu šūnu transformācijā un audzēja šūnu metabolismā.

Turklāt H4-II-E-C3 šūnas izmanto, lai pētītu aldehīdu metabolismu, jo īpaši mitohondriālās 2. klases aldehīda dehidrogenāzes (ALDH2) aktivitāti. Šis enzīms ir būtisks etanola oksidācijas procesā radušā acetaldehīda metabolizēšanai, tādējādi padarot šo šūnu līniju piemērotu pētījumiem par alkohola metabolismu un tā ietekmi uz šūnām. „Acetaldehīda skavas” metodes izmantošana šajās šūnās ir ļāvusi precīzi noteikt ALDH2 aktivitāti bez nepieciešamības izdalīt mitohondrijas, tādējādi atvieglojot fermentu kinētikas pētījumus un dažādu inhibitoru ietekmes uz aldehīdu detoksikāciju izpēti.

Audums
Aknas
Slimība
Hepatocelulārā karcinoma
Sinonīmi
  • H4IIEC3
  • H4-IIE-C3
  • H4-II-EC3
  • H-II-E-C3

02Klasifikācija

Organisms
Žurka
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This rat hepatocellular carcinoma cell line (H4-II-E-C3) contains undefined modifications classified as GMO, stably present in the transformed hepatic cell line. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Tumorogēns
Jā, AxC žurkām

04Identifikatori

Atsauce
H4-II-E-C3 (Cytion kataloga numurs 305336)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10116
Cellosaurus
CVCL_0285

05Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
Gēnu ekspresija: tirozīna aminotransferāze, albumīns, transferīns, protrombīns

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1–3 × 10⁴/cm²
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
AxC
Donora vecums
Nav norādīts