Премини към съдържанието
H4-II-E-C3
Тъкан
Черен дроб
Заболяване
Хепатоцелуларен карцином
Синоними
H4IIEC3, H4-IIE-C3, H4-II-EC3, H-II-E-C3

Документи

H4-II-E-C3

Cell line · Номер на продукта 305336

The H4-II-E-C3 cell line is a well-established rat hepatoma cell line derived from liver carcinoma. This line is widely used in research focused on liver-...

€550.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия H4-II-E-C3 е добре установена клетъчна линия от хепатома на плъх, получена от карцином на черния дроб. Тази линия се използва широко в изследвания, насочени към специфичните за черния дроб функции и метаболитните процеси, протичащи в хепатоцитите. Една забележителна характеристика на клетките H4-II-E-C3 е високата експресия на глутаматния транспортер с висока афинитет GLT-1A. Тази характеристика ги отличава от нормалните хепатоцити на плъхове, които не проявяват значителни нива на този транспортер. Експресията на GLT-1A в клетките H4-II-E-C3 позволява ефективно проучване на метаболизма и транспорта на глутамат, като предоставя информация за трансформацията на чернодробните клетки и метаболизма на туморните клетки.

Освен това клетките H4-II-E-C3 се използват за изследване на метаболизма на алдехидите, по-специално на активността на митохондриалната алдехид дехидрогеназа от клас 2 (ALDH2). Този ензим е от решаващо значение за метаболизирането на ацеталдехида, образуван при окисляването на етанола, което прави тази клетъчна линия подходяща за изследвания върху метаболизма на алкохола и неговите клетъчни ефекти. Използването на техниката „ацеталдехиден клемп“ в тези клетки позволява прецизно измерване на активността на ALDH2 без необходимост от изолиране на митохондриите, което улеснява изследването на ензимната кинетика и въздействието на различни инхибитори върху детоксикацията на алдехидите.

Тъкан
Черен дроб
Заболяване
Хепатоцелуларен карцином
Синоними
  • H4IIEC3
  • H4-IIE-C3
  • H4-II-EC3
  • H-II-E-C3

02Класификация

Организъм
Плъх
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
GMO-S1
Подробности относно статуса на ГМО
GMO-S1: This rat hepatocellular carcinoma cell line (H4-II-E-C3) contains undefined modifications classified as GMO, stably present in the transformed hepatic cell line. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Туморогенен
Да, при плъхове от линията AxC

04Идентификатори

Източник
H4-II-E-C3 (каталожен номер на Cytion 305336)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10116
Целозавър
CVCL_0285

05Проява и предразположеност

Експресия на протеини
Генна експресия: тирозин аминотрансфераза, албумин, трансферин, протромбин

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
1–3 × 10⁴/см²
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Порода / подвид
AxC
Възраст на донора
Неуточнено