Gå direkt till innehållet
H4-II-E-C3
Vävnad
Lever
Sjukdom
Hepatocellulärt karcinom
Synonymer
H4IIEC3, H4-IIE-C3, H4-II-EC3, H-II-E-C3

H4-II-E-C3

Cell line · Produktnummer 305336

The H4-II-E-C3 cell line is a well-established rat hepatoma cell line derived from liver carcinoma. This line is widely used in research focused on liver-...

€550.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

Cellinjen H4-II-E-C3 är en väletablerad hepatomcellinje från råtta som härstammar från leverkarcinom. Denna cellinje används i stor utsträckning inom forskning som inriktar sig på leverspecifika funktioner och de metaboliska processer som äger rum i hepatocyterna. En anmärkningsvärd egenskap hos H4-II-E-C3-celler är deras höga uttryck av den högaffinitetsglutamattransportören GLT-1A. Denna egenskap skiljer dem från normala råtthepatocyter, som inte uppvisar några signifikanta nivåer av denna transportör. Uttrycket av GLT-1A i H4-II-E-C3-celler möjliggör en effektiv studie av glutamatmetabolism och -transport, vilket ger insikter i levercellers transformation och tumörcellers metabolism.

Dessutom används H4-II-E-C3-celler för att studera aldehydmetabolismen, särskilt aktiviteten hos mitokondriellt klass 2-aldehyddehydrogenas (ALDH2). Detta enzym är avgörande för metaboliseringen av acetaldehyd som bildas vid etanoloxidation, vilket gör denna cellinje lämplig för forskning om alkoholmetabolism och dess cellulära effekter. Användningen av en ”acetaldehyd-clamp”-teknik i dessa celler har möjliggjort precisa mätningar av ALDH2-aktiviteten utan behov av mitokondriell isolering, vilket underlättar studien av enzymkinetik och effekten av olika hämmare på aldehydavgiftningen.

Vävnad
Lever
Sjukdom
Hepatocellulärt karcinom
Synonymer
  • H4IIEC3
  • H4-IIE-C3
  • H4-II-EC3
  • H-II-E-C3

02Klassificering

Organism
Råtta
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This rat hepatocellular carcinoma cell line (H4-II-E-C3) contains undefined modifications classified as GMO, stably present in the transformed hepatic cell line. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Tumörframkallande
Ja, hos AxC-råttor

04Identifierare

Källa
H4-II-E-C3 (Cytion-katalognummer 305336)
NCBI-skattenummer
10116
Cellosaurus
CVCL_0285

05Uttryck och mottaglighet

Proteinexpression
Genuttryck: tyrosinaminotransferas, albumin, transferrin, protrombin

06Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukos, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
1–3 × 10⁴/cm²
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Ras / underart
AxC
Donatorns ålder
Ospecificerad