Siirry sisältöön
H4-II-E-C3
Kudos
Maksa
Sairaus
Maksasolusyöpä
Synonyymit
H4IIEC3, H4-IIE-C3, H4-II-EC3, H-II-E-C3

Asiakirjat

H4-II-E-C3

Cell line · Tuotenumero 305336

The H4-II-E-C3 cell line is a well-established rat hepatoma cell line derived from liver carcinoma. This line is widely used in research focused on liver-...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

H4-II-E-C3-solulinja on vakiintunut rotan hepatoma-solulinja, joka on peräisin maksasyövästä. Tätä solulinjaa käytetään laajalti tutkimuksissa, jotka keskittyvät maksakohtaisiin toimintoihin ja hepatosyyteissä tapahtuviin aineenvaihduntaprosesseihin. Yksi H4-II-E-C3-solujen merkittävä piirre on niiden korkea affiniteetin omaavan glutamaattikuljettajan GLT-1A:n ilmentyminen. Tämä ominaisuus erottaa ne normaaleista rotan hepatosyyteistä, joissa tämän kuljettajan pitoisuudet eivät ole merkittäviä. GLT-1A:n ilmentyminen H4-II-E-C3-soluissa mahdollistaa glutamaatin aineenvaihdunnan ja kuljetuksen tehokkaan tutkimisen, mikä tarjoaa tietoa maksasolujen transformaatiosta ja kasvainsolujen aineenvaihdunnasta.

Lisäksi H4-II-E-C3-soluja käytetään aldehydien aineenvaihdunnan tutkimiseen, erityisesti mitokondriaalisen luokan 2 aldehydidehydrogenaasin (ALDH2) aktiivisuuden selvittämiseen. Tämä entsyymi on ratkaisevan tärkeä etanolin hapettumisen aikana syntyvän asetaldehydin aineenvaihdunnassa, minkä vuoksi tämä solulinja sopii hyvin alkoholin aineenvaihdunnan ja sen solutason vaikutusten tutkimukseen. ”Asetaldehydiklipsi”-tekniikan käyttö näissä soluissa on mahdollistanut ALDH2-aktiivisuuden tarkan mittaamisen ilman, että mitokondrioita on tarvinnut eristää, mikä helpottaa entsyymikineettisten ominaisuuksien tutkimusta sekä erilaisten estäjien vaikutusten selvittämistä aldehydien detoksifikaatioon.

Kudos
Maksa
Sairaus
Maksasolusyöpä
Synonyymit
  • H4IIEC3
  • H4-IIE-C3
  • H4-II-EC3
  • H-II-E-C3

02Luokittelu

Organismi
Rotta
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This rat hepatocellular carcinoma cell line (H4-II-E-C3) contains undefined modifications classified as GMO, stably present in the transformed hepatic cell line. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, AxC-rotilla

04Tunnisteet

Lähdeviite
H4-II-E-C3 (Cytionin tuotenumero 305336)
NCBI-verotunnus
10116
Cellosaurus
CVCL_0285

05Ilmentyminen ja alttius

Proteiinin ilmentyminen
Geenien ilmentyminen: tyrosiiniaminotransferaasi, albumiini, transferriini, protrombiini

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1–3 × 10⁴/cm²
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
AxC
Luovuttajan ikä
Määrittelemätön