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H4-II-E-C3
Tissue
Foie
Disease
Carcinome hépatocellulaire
Synonyms
H4IIEC3, H4-IIE-C3, H4-II-EC3, H-II-E-C3

Documents

H4-II-E-C3

Cell line · Product number 305336

The H4-II-E-C3 cell line is a well-established rat hepatoma cell line derived from liver carcinoma. This line is widely used in research focused on liver-...

US$540.00excl. tax and shipping
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Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

La lignée cellulaire H4-II-E-C3 est une lignée bien établie d’hépatome de rat dérivée d’un carcinome hépatique. Cette lignée est largement utilisée dans la recherche axée sur les fonctions spécifiques du foie et les processus métaboliques qui se déroulent au sein des hépatocytes. L’une des caractéristiques notables des cellules H4-II-E-C3 est leur forte expression du transporteur de glutamate à haute affinité GLT-1A. Cette particularité les distingue des hépatocytes normaux de rat, qui ne présentent pas de niveaux significatifs de ce transporteur. L’expression de GLT-1A dans les cellules H4-II-E-C3 permet d’étudier efficacement le métabolisme et le transport du glutamate, fournissant ainsi des informations sur la transformation des cellules hépatiques et le métabolisme des cellules tumorales.

De plus, les cellules H4-II-E-C3 sont utilisées pour étudier le métabolisme des aldéhydes, en particulier l’activité de l’aldéhyde déshydrogénase mitochondriale de classe 2 (ALDH2). Cette enzyme joue un rôle essentiel dans le métabolisme de l’acétaldéhyde produit lors de l’oxydation de l’éthanol, ce qui rend cette lignée cellulaire appropriée pour la recherche sur le métabolisme de l’alcool et ses effets cellulaires. L’utilisation d’une technique dite de « clamp à l’acétaldéhyde » sur ces cellules a permis de mesurer avec précision l’activité de l’ALDH2 sans qu’il soit nécessaire d’isoler les mitochondries, facilitant ainsi l’étude de la cinétique enzymatique et de l’impact de divers inhibiteurs sur la détoxification des aldéhydes.

Tissue
Foie
Disease
Carcinome hépatocellulaire
Synonyms
  • H4IIEC3
  • H4-IIE-C3
  • H4-II-EC3
  • H-II-E-C3

02Classification

Organism
Rat
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This rat hepatocellular carcinoma cell line (H4-II-E-C3) contains undefined modifications classified as GMO, stably present in the transformed hepatic cell line. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Tumourigenic
Oui, chez les rats AxC

04Identifiers

Citation
H4-II-E-C3 (numéro de catalogue Cytion 305336)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_0285

05Expression and susceptibility

Protein expression
Expression génique : tyrosine aminotransférase, albumine, transferrine, prothrombine

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Seeding density
1-3 × 10⁴/cm²
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Breed / subspecies
AxC
Donor age
Non précisé