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H4-II-E-C3
Pañuelo de papel
Hígado
Enfermedad
Carcinoma hepatocelular
Sinónimos
H4IIEC3, H4-IIE-C3, H4-II-EC3, H-II-E-C3

Documentos

H4-II-E-C3

Cell line · Número de producto 305336

The H4-II-E-C3 cell line is a well-established rat hepatoma cell line derived from liver carcinoma. This line is widely used in research focused on liver-...

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01Información general

Descripción

La línea celular H4-II-E-C3 es una línea celular de hepatoma de rata bien establecida, derivada de un carcinoma hepático. Esta línea se utiliza ampliamente en investigaciones centradas en las funciones específicas del hígado y en los procesos metabólicos que tienen lugar en los hepatocitos. Un aspecto destacable de las células H4-II-E-C3 es su elevada expresión del transportador de glutamato de alta afinidad GLT-1A. Esta característica las distingue de los hepatocitos normales de rata, que no presentan niveles significativos de este transportador. La expresión de GLT-1A en las células H4-II-E-C3 permite estudiar de forma eficaz el metabolismo y el transporte del glutamato, lo que aporta información sobre la transformación de las células hepáticas y el metabolismo de las células tumorales.

Además, las células H4-II-E-C3 se utilizan para estudiar el metabolismo de los aldehídos, en particular la actividad de la aldehído deshidrogenasa mitocondrial de clase 2 (ALDH2). Esta enzima es fundamental para metabolizar el acetaldehído producido durante la oxidación del etanol, lo que hace que esta línea celular sea adecuada para la investigación sobre el metabolismo del alcohol y sus efectos celulares. El uso de la técnica del «clamp de acetaldehído» en estas células ha permitido medir con precisión la actividad de la ALDH2 sin necesidad de aislar las mitocondrias, lo que facilita el estudio de la cinética enzimática y el impacto de diversos inhibidores en la desintoxicación de los aldehídos.

Pañuelo de papel
Hígado
Enfermedad
Carcinoma hepatocelular
Sinónimos
  • H4IIEC3
  • H4-IIE-C3
  • H4-II-EC3
  • H-II-E-C3

02Clasificación

Organismo
Rata
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Situación respecto a los OMG
GMO-S1
Detalles sobre la presencia de OMG
GMO-S1: This rat hepatocellular carcinoma cell line (H4-II-E-C3) contains undefined modifications classified as GMO, stably present in the transformed hepatic cell line. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Tumorigénico
Sí, en ratas AxC

04Identificadores

Referencia
H4-II-E-C3 (número de catálogo de Cytion 305336)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0285

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de proteínas
Expresión génica: tirosina aminotransferasa, albúmina, transferrina, protrombina

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
1-3*10^4/cm²
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Raza / subespecie
AxC
Edad del donante
Sin especificar