
- Tissue
- Hígado
- Disease
- Carcinoma hepatocelular
- Synonyms
- H4IIEC3, H4-IIE-C3, H4-II-EC3, H-II-E-C3
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H4-II-E-C3
Cell line · Product number 305336
The H4-II-E-C3 cell line is a well-established rat hepatoma cell line derived from liver carcinoma. This line is widely used in research focused on liver-...
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01General information
- Description
La línea celular H4-II-E-C3 es una línea celular de hepatoma de rata bien establecida, derivada de un carcinoma hepático. Esta línea se utiliza ampliamente en investigaciones centradas en las funciones específicas del hígado y en los procesos metabólicos que tienen lugar dentro de los hepatocitos. Un aspecto notable de las células H4-II-E-C3 es su alta expresión del transportador de glutamato de alta afinidad GLT-1A. Esta característica las distingue de los hepatocitos normales de rata, los cuales no presentan niveles significativos de este transportador. La expresión de GLT-1A en las células H4-II-E-C3 permite estudiar de manera eficiente el metabolismo y el transporte del glutamato, lo que brinda información sobre la transformación de las células hepáticas y el metabolismo de las células tumorales.
Además, las células H4-II-E-C3 se utilizan para estudiar el metabolismo de los aldehídos, en particular la actividad de la aldehído deshidrogenasa mitocondrial de clase 2 (ALDH2). Esta enzima es fundamental para metabolizar el acetaldehído producido durante la oxidación del etanol, lo que hace que esta línea celular sea adecuada para la investigación sobre el metabolismo del alcohol y sus efectos celulares. El uso de la técnica de «clamp de acetaldehído» en estas células ha permitido medir con precisión la actividad de la ALDH2 sin necesidad de aislar las mitocondrias, lo que facilita el estudio de la cinética enzimática y el impacto de diversos inhibidores en la desintoxicación de los aldehídos.
- Tissue
- Hígado
- Disease
- Carcinoma hepatocelular
- Synonyms
- H4IIEC3
- H4-IIE-C3
- H4-II-EC3
- H-II-E-C3
02Classification
- Organism
- Rat
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This rat hepatocellular carcinoma cell line (H4-II-E-C3) contains undefined modifications classified as GMO, stably present in the transformed hepatic cell line. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Tumourigenic
- Sí, en ratas AxC
04Identifiers
- Citation
- H4-II-E-C3 (número de catálogo de Cytion 305336)
- NCBI TaxID
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_0285
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- Expresión génica: tirosina aminotransferasa, albúmina, transferrina, protrombina
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, p/v: 4,5 g/L de glucosa, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sodio (número de artículo de Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
- Supplements
- Añade al medio un 10 % de FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
- Seeding density
- 1-3*10^4/cm²
- Fluid renewal
- De 2 a 3 veces por semana
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.
Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.
- Freeze medium
- Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
- Storage conditions
Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.
- Shipping conditions
Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
08Donor
- Breed / subspecies
- AxC
- Donor age
- Sin especificar
09Legal and safety
- Safety precautions
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su descongelación futura, es obligatorio cumplir con estrictas medidas de seguridad. Es esencial contar con guantes y ropa de protección adecuados, y se requiere el uso de una mascarilla o lentes de seguridad durante la transferencia de muestras congeladas hacia o desde el tanque de nitrógeno líquido. Esto tiene como objetivo mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones de los criotubos al retirarlos, lo que puede provocar la proyección de fragmentos afilados.
- Warranty
En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.
Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.
- Material Transfer Agreement required
- Yes