Skip to content
H4-II-E-C3
Tissue
כבד
Disease
קרצינומה הפטוצלולרית
Synonyms
H4IIEC3, H4-IIE-C3, H4-II-EC3, H-II-E-C3

Documents

H4-II-E-C3

Cell line · Product number 305336

The H4-II-E-C3 cell line is a well-established rat hepatoma cell line derived from liver carcinoma. This line is widely used in research focused on liver-...

US$540.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים H4-II-E-C3 הוא קו תאים מבוסס היטב של הפטומה בחולדות, שמקורו בקרצינומה של הכבד. קו זה נמצא בשימוש נרחב במחקרים המתמקדים בתפקודים ספציפיים לכבד ובתהליכים המטבוליים המתרחשים בתוך תאי הכבד. מאפיין בולט של תאי H4-II-E-C3 הוא הביטוי הגבוה של GLT-1A, מוביל הגלוטמט בעל הזיקה הגבוהה. תכונה זו מבדילה אותם מתאי כבד נורמליים של חולדות, אשר אינם מפגינים רמות משמעותיות של מוביל זה. הביטוי של GLT-1A בתאי H4-II-E-C3 מאפשר מחקר יעיל של חילוף החומרים וההובלה של הגלוטמט, ומספק תובנות לגבי התמרה של תאי כבד וחילוף החומרים בתאי הגידול.

בנוסף, תאי H4-II-E-C3 משמשים לחקר חילוף החומרים של אלדהיד, ובפרט לפעילותו של אלדהיד דהידרוגנאז מיטוכונדריאלי מסוג 2 (ALDH2). אנזים זה חיוני לחילוף החומרים של אצטאלדהיד הנוצר במהלך חמצון אתנול, מה שהופך את קו התאים הזה למתאים למחקר על חילוף החומרים של אלכוהול והשפעותיו התאיות. השימוש בטכניקת "אצטאלדהיד קלאמפ" בתאים אלה איפשר מדידה מדויקת של פעילות ה-ALDH2 ללא צורך בבידוד המיטוכונדריה, ובכך הקל על חקר הקינטיקה האנזימטית והשפעתם של מעכבים שונים על פירוק האלדהיד.

Tissue
כבד
Disease
קרצינומה הפטוצלולרית
Synonyms
  • H4IIEC3
  • H4-IIE-C3
  • H4-II-EC3
  • H-II-E-C3

02Classification

Organism
Rat
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This rat hepatocellular carcinoma cell line (H4-II-E-C3) contains undefined modifications classified as GMO, stably present in the transformed hepatic cell line. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Tumourigenic
כן, בחולדות AxC

04Identifiers

Citation
H4-II-E-C3 (מספר קטלוג Cytion 305336)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_0285

05Expression and susceptibility

Protein expression
ביטוי גנים: טירוזין אמינוטרנספראז, אלבומין, טרנספרין, פרוטרומבין

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
1–3*10^4/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Breed / subspecies
AxC
Donor age
לא צוין