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L Wnt-3A
Tissu
Tissu conjonctif sous-cutané, aréolaire et adipeux
Synonymes
L-Wnt-3A, L-Wnt3A, LWnt3A, LWnt-3A

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L Wnt-3A

Cell line · Référence du produit 305184

The L Wnt-3A cell line is a derivative of the L cells, originally derived from mouse fibroblast cells. This cell line is specifically engineered to stably...

€430.00hors taxes et frais de port
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Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire L Wnt-3A est un dérivé des cellules L, originellement dérivées de fibroblastes de souris. Cette lignée cellulaire est spécifiquement conçue pour exprimer de façon stable la protéine Wnt-3A, un composant essentiel de la voie de signalisation Wnt. La signalisation Wnt est cruciale pour divers processus de développement, notamment la prolifération, la différenciation et la migration des cellules. L'expression stable de Wnt-3A dans cette lignée cellulaire en fait un outil précieux pour l'étude des mécanismes moléculaires qui sous-tendent ces processus biologiques, en particulier dans le contexte de la recherche sur le cancer, la régénération des tissus et le développement embryonnaire.

Les chercheurs utilisent souvent la lignée cellulaire L Wnt-3A pour produire un milieu conditionné riche en Wnt-3A, qui peut ensuite être utilisé pour activer la signalisation Wnt dans d'autres types de cellules. Cette application est particulièrement utile dans l'étude de la biologie des cellules souches et de la médecine régénérative, où la signalisation Wnt joue un rôle essentiel dans le maintien de la pluripotence des cellules souches et dans la promotion de la réparation des tissus. En outre, la lignée cellulaire sert de modèle pour étudier la dysrégulation de la signalisation Wnt dans divers cancers, ce qui permet de mieux comprendre les cibles thérapeutiques et les traitements potentiels.

En raison de l'expression robuste et fiable de Wnt-3A, la lignée cellulaire L Wnt-3A est largement utilisée dans les laboratoires pour étudier les effets de la signalisation Wnt sur différents processus cellulaires. Elle constitue une ressource indispensable pour les scientifiques qui cherchent à élucider les complexités des fonctions cellulaires médiées par Wnt et à développer de nouvelles stratégies pour moduler cette voie dans des contextes pathologiques.

Tissu
Tissu conjonctif sous-cutané, aréolaire et adipeux
Synonymes
  • L-Wnt-3A
  • L-Wnt3A
  • LWnt3A
  • LWnt-3A

02Classification

Organisme
Souris
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
GMO-S1
Informations détaillées sur le statut OGM
GMO-S1: This murine L-cell-derived line (L Wnt-3A) contains a Wnt3a expression construct under PGK promoter control with neomycin resistance, enabling secretion of Wnt3a. The insert is stably integrated into L-cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Fibroblaste

04Identifiants

Référence
L Wnt-3A (Cytion numéro de catalogue 305184)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0635

05Expression et sensibilité

Expression des protéines
Wnt-3A

06Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10 % de FBS, 0,4 mg/mL de G-418
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Race / sous-espèce
C3H/An
Âge du donneur
100 jours