Langsung ke isi
L Wnt-3A
Tisu
Jaringan ikat subkutan, areolar dan adiposa
Sinonim
L-Wnt-3A, L-Wnt3A, LWnt3A, LWnt-3A

Dokumen

L Wnt-3A

Cell line · Nomor produk 305184

The L Wnt-3A cell line is a derivative of the L cells, originally derived from mouse fibroblast cells. This cell line is specifically engineered to stably...

€430.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

Garis sel L Wnt-3A adalah turunan dari sel L, yang awalnya berasal dari sel fibroblast tikus. Garis sel ini secara khusus direkayasa untuk mengekspresikan protein Wnt-3A secara stabil, komponen penting dari jalur pensinyalan Wnt. Pensinyalan Wnt sangat penting untuk berbagai proses perkembangan, termasuk proliferasi, diferensiasi, dan migrasi sel. Ekspresi Wnt-3A yang stabil dalam garis sel ini menjadikannya alat yang berharga untuk mempelajari mekanisme molekuler yang mendasari proses biologis ini, terutama dalam konteks penelitian kanker, regenerasi jaringan, dan perkembangan embrio.

Para peneliti sering menggunakan garis sel L Wnt-3A untuk menghasilkan media terkondisi yang kaya akan Wnt-3A, yang kemudian dapat digunakan untuk mengaktifkan pensinyalan Wnt pada jenis sel lain. Aplikasi ini sangat bermanfaat dalam studi biologi sel punca dan pengobatan regeneratif, di mana pensinyalan Wnt memainkan peran penting dalam mempertahankan pluripotensi sel punca dan mendorong perbaikan jaringan. Selain itu, garis sel berfungsi sebagai model untuk menyelidiki disregulasi pensinyalan Wnt pada berbagai jenis kanker, memberikan wawasan tentang target terapi dan pengobatan yang potensial.

Karena ekspresi Wnt-3A yang kuat dan dapat diandalkan, garis sel L Wnt-3A banyak digunakan di laboratorium untuk mengeksplorasi efek pensinyalan Wnt pada proses seluler yang berbeda. Ini adalah sumber daya yang sangat diperlukan bagi para ilmuwan yang bertujuan untuk mengungkap kompleksitas fungsi seluler yang dimediasi Wnt dan untuk mengembangkan strategi baru untuk memodulasi jalur ini dalam konteks penyakit.

Tisu
Jaringan ikat subkutan, areolar dan adiposa
Sinonim
  • L-Wnt-3A
  • L-Wnt3A
  • LWnt3A
  • LWnt-3A

02Klasifikasi

Organisme
Tikus
Seks
Laki-laki
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Status GMO
GMO-S1
Rincian status GMO
GMO-S1: This murine L-cell-derived line (L Wnt-3A) contains a Wnt3a expression construct under PGK promoter control with neomycin resistance, enabling secretion of Wnt3a. The insert is stably integrated into L-cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Fibroblast

04Pengidentifikasi

Referensi
L Wnt-3A (nomor katalog Cytion 305184)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0635

05Ekspresi dan kerentanan

Ekspresi protein
Wnt-3A

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
DMEM, w: 4,5 g/L Glukosa, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natrium piruvat (Nomor artikel Cytion 820300a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS, 0,4 mg/mL G-418
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pencairan dan pembiakan

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Jenis / subspesies
C3H / An
Usia donor
100 hari