Prejsť na obsah
L Wnt-3A
Tkanivo
Podkožné spojivové tkanivo, areolárne a tukové tkanivo
Synonymá
L-Wnt-3A, L-Wnt3A, LWnt3A, LWnt-3A

Dokumenty

L Wnt-3A

Cell line · Číslo výrobku 305184

The L Wnt-3A cell line is a derivative of the L cells, originally derived from mouse fibroblast cells. This cell line is specifically engineered to stably...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia L Wnt-3A je derivátom buniek L, pôvodne odvodených z buniek myších fibroblastov. Táto bunková línia je špeciálne navrhnutá tak, aby stabilne exprimovala proteín Wnt-3A, kritickú zložku signálnej dráhy Wnt. Signalizácia Wnt je kľúčová pre rôzne vývojové procesy vrátane bunkovej proliferácie, diferenciácie a migrácie. Stabilná expresia Wnt-3A v tejto bunkovej línii z nej robí cenný nástroj na štúdium molekulárnych mechanizmov, ktoré sú základom týchto biologických procesov, najmä v kontexte výskumu rakoviny, regenerácie tkanív a embryonálneho vývoja.

Výskumníci často využívajú bunkovú líniu L Wnt-3A na výrobu kondicionovaného média bohatého na Wnt-3A, ktoré sa potom môže použiť na aktiváciu signalizácie Wnt v iných typoch buniek. Toto použitie je obzvlášť prospešné pri štúdiu biológie kmeňových buniek a regeneratívnej medicíny, kde signalizácia Wnt zohráva kľúčovú úlohu pri udržiavaní pluripotencie kmeňových buniek a podpore obnovy tkanív. Okrem toho táto bunková línia slúži ako model na skúmanie dysregulácie signalizácie Wnt pri rôznych druhoch rakoviny, čo poskytuje poznatky o potenciálnych terapeutických cieľoch a liečbe.

Vzhľadom na silnú a spoľahlivú expresiu Wnt-3A sa bunková línia L Wnt-3A široko používa v laboratóriách na skúmanie účinkov signalizácie Wnt na rôzne bunkové procesy. Je nepostrádateľným zdrojom informácií pre vedcov, ktorí sa snažia odhaliť zložitosť bunkových funkcií sprostredkovaných Wnt a vyvinúť nové stratégie na moduláciu tejto dráhy v kontexte ochorení.

Tkanivo
Podkožné spojivové tkanivo, areolárne a tukové tkanivo
Synonymá
  • L-Wnt-3A
  • L-Wnt3A
  • LWnt3A
  • LWnt-3A

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S1: This murine L-cell-derived line (L Wnt-3A) contains a Wnt3a expression construct under PGK promoter control with neomycin resistance, enabling secretion of Wnt3a. The insert is stably integrated into L-cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Fibroblasty

04Identifikátory

Citácia
L Wnt-3A (katalógové číslo Cytion 305184)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0635

05Prejav a náchylnosť

Expresia proteínov
Wnt-3A

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS, 0,4 mg/ml G-418
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Plemeno / poddruh
C3H/An
Vek darcu
100 dní