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- Tecido
- Tecido conjuntivo subcutâneo, areolar e adiposo
- Sinónimos
- L-Wnt-3A, L-Wnt3A, LWnt3A, LWnt-3A
Documentos
L Wnt-3A
Cell line · Número do produto 305184
The L Wnt-3A cell line is a derivative of the L cells, originally derived from mouse fibroblast cells. This cell line is specifically engineered to stably...
Personalização / Recomendações
- L Wnt-3ACell line€430.00
Recomendado (lote mais recente)
01Informações gerais
- Descrição
A linha celular L Wnt-3A é um derivado das células L, originalmente derivadas de células de fibroblastos de ratinho. Esta linha celular foi especificamente concebida para expressar de forma estável a proteína Wnt-3A, um componente crítico da via de sinalização Wnt. A sinalização Wnt é crucial para vários processos de desenvolvimento, incluindo a proliferação, diferenciação e migração celular. A expressão estável da Wnt-3A nesta linha celular torna-a uma ferramenta valiosa para o estudo dos mecanismos moleculares subjacentes a estes processos biológicos, particularmente no contexto da investigação do cancro, da regeneração de tecidos e do desenvolvimento embrionário.
Os investigadores utilizam frequentemente a linha celular L Wnt-3A para produzir um meio condicionado rico em Wnt-3A, que pode depois ser utilizado para ativar a sinalização Wnt noutros tipos de células. Esta aplicação é especialmente benéfica no estudo da biologia das células estaminais e da medicina regenerativa, onde a sinalização Wnt desempenha um papel fundamental na manutenção da pluripotência das células estaminais e na promoção da reparação dos tecidos. Além disso, a linha celular serve de modelo para investigar a desregulação da sinalização Wnt em vários cancros, fornecendo informações sobre potenciais alvos terapêuticos e tratamentos.
Devido à expressão robusta e fiável de Wnt-3A, a linha celular L Wnt-3A é amplamente utilizada em laboratórios para explorar os efeitos da sinalização Wnt em diferentes processos celulares. É um recurso indispensável para os cientistas que pretendem desvendar as complexidades das funções celulares mediadas por Wnt e desenvolver novas estratégias para modular esta via em contextos de doença.
- Tecido
- Tecido conjuntivo subcutâneo, areolar e adiposo
- Sinónimos
- L-Wnt-3A
- L-Wnt3A
- LWnt3A
- LWnt-3A
02Classificação
- Organismo
- Rato
- Sexo
- Masculino
- Propriedades de crescimento
- Aderente
- Estatuto em matéria de OGM
- GMO-S1
- Detalhes sobre o estatuto dos OGM
- GMO-S1: This murine L-cell-derived line (L Wnt-3A) contains a Wnt3a expression construct under PGK promoter control with neomycin resistance, enabling secretion of Wnt3a. The insert is stably integrated into L-cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Nível de biossegurança
- 1
03Características
- Morfologia
- Fibroblastos
04Identificadores
- Referência
- L Wnt-3A (número de catálogo da Cytion 305184)
- Número de identificação fiscal do NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_0635
05Expressão e suscetibilidade
- Expressão proteica
- Wnt-3A
06Manuseamento e cultura
- Meio de cultura
- DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
- Atmosfera de incubação
37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.
- Suplementos
- Suplementar o meio com 10% de FBS, 0,4 mg/mL de G-418
- Reagente de dissociação
- Accutase
- Subcultura
- Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Renovação de fluidos
- 2 a 3 vezes por semana
- Descongelamento e cultura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controlo de qualidade e criopreservação
- Esterilidade
A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.
- Meio de congelação
- Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
- Condições de armazenamento
Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.
- Condições de envio
As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
08Doador
- Raça / subespécie
- C3H/An
- Idade do dador
- 100 dias
09Aspectos legais e de segurança
- Precauções de segurança
- Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.
- Garantia
Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto
Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia
- É necessário um Acordo de Transferência de Material
- Sim