Preskoči na vsebino
L Wnt-3A
Tkivo
Podkožno vezivno tkivo, areolarno in maščobno tkivo
Sinonimi
L-Wnt-3A, L-Wnt3A, LWnt3A, LWnt-3A

Dokumenti

L Wnt-3A

Cell line · Številka izdelka 305184

The L Wnt-3A cell line is a derivative of the L cells, originally derived from mouse fibroblast cells. This cell line is specifically engineered to stably...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija L Wnt-3A je izpeljanka celic L, ki so bile prvotno pridobljene iz celic mišjega fibroblasta. Ta celična linija je posebej zasnovana za stabilno izražanje beljakovine Wnt-3A, ki je ključna sestavina signalne poti Wnt. Signalizacija Wnt je ključna za različne razvojne procese, vključno s proliferacijo, diferenciacijo in migracijo celic. Zaradi stabilnega izražanja proteina Wnt-3A v tej celični liniji je ta dragoceno orodje za preučevanje molekularnih mehanizmov, na katerih temeljijo ti biološki procesi, zlasti v okviru raziskav raka, regeneracije tkiv in embrionalnega razvoja.

Raziskovalci pogosto uporabljajo celično linijo L Wnt-3A za proizvodnjo kondicioniranega medija, bogatega z Wnt-3A, ki se lahko nato uporabi za aktivacijo signalizacije Wnt v drugih vrstah celic. Ta uporaba je še posebej koristna pri študiju biologije matičnih celic in regenerativne medicine, kjer ima signalizacija Wnt ključno vlogo pri ohranjanju pluripotentnosti matičnih celic in spodbujanju obnove tkiv. Poleg tega celična linija služi kot model za preučevanje motenj v regulaciji signalizacije Wnt pri različnih vrstah raka, kar omogoča vpogled v potencialne terapevtske cilje in načine zdravljenja.

Zaradi močnega in zanesljivega izražanja Wnt-3A se celična linija L Wnt-3A pogosto uporablja v laboratorijih za raziskovanje učinkov signalizacije Wnt na različne celične procese. Je nepogrešljiv vir za znanstvenike, ki si prizadevajo razkriti zapletenost celičnih funkcij, ki jih posreduje Wnt, in razviti nove strategije za modulacijo te poti v kontekstu bolezni.

Tkivo
Podkožno vezivno tkivo, areolarno in maščobno tkivo
Sinonimi
  • L-Wnt-3A
  • L-Wnt3A
  • LWnt3A
  • LWnt-3A

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This murine L-cell-derived line (L Wnt-3A) contains a Wnt3a expression construct under PGK promoter control with neomycin resistance, enabling secretion of Wnt3a. The insert is stably integrated into L-cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Fibroblast

04Identifikatorji

Navajanje vira
L Wnt-3A (kataloška številka Cytion 305184)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0635

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija beljakovin
Wnt-3A

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS, 0,4 mg/ml G-418
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Pasma / podvrsta
C3H/An
Starost darovalca
100 dni