الانتقال إلى المحتوى
L Wnt-3A
الأنسجة
النسيج الضام تحت الجلد، والنسيج الضام تحت الجلد، والأروية والشحمية
المرادفات
L-Wnt-3A, L-Wnt3A, LWnt3A, LWnt-3A

المستندات

L Wnt-3A

Cell line · رقم المنتج 305184

The L Wnt-3A cell line is a derivative of the L cells, originally derived from mouse fibroblast cells. This cell line is specifically engineered to stably...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

الخط الخلوي L Wnt-3A هو أحد مشتقات الخلايا L المشتقة في الأصل من خلايا الأرومة الليفية للفأر. صُمم هذا الخط الخلوي خصيصاً للتعبير بثبات عن بروتين Wnt-3A، وهو مكون أساسي في مسار إشارات Wnt. تُعد إشارات Wnt أمرًا حاسمًا لمختلف عمليات النمو، بما في ذلك تكاثر الخلايا وتمايزها وهجرتها. إن التعبير المستقر لبروتين Wnt-3A في هذا الخط الخلوي يجعله أداة قيّمة لدراسة الآليات الجزيئية الكامنة وراء هذه العمليات البيولوجية، خاصة في سياق أبحاث السرطان وتجديد الأنسجة والتطور الجنيني.

غالبًا ما يستخدم الباحثون خط الخلايا L Wnt-3A لإنتاج وسط مكيف غني ب Wnt-3A، والذي يمكن استخدامه بعد ذلك لتنشيط إشارات Wnt في أنواع الخلايا الأخرى. ويعد هذا التطبيق مفيداً بشكل خاص في دراسة بيولوجيا الخلايا الجذعية والطب التجديدي، حيث تلعب إشارات Wnt دوراً محورياً في الحفاظ على تعدد الخلايا الجذعية وتعزيز إصلاح الأنسجة. بالإضافة إلى ذلك، يعمل خط الخلية كنموذج للتحقيق في خلل تنظيم إشارات Wnt في مختلف أنواع السرطان، مما يوفر رؤى حول الأهداف العلاجية والعلاجات المحتملة.

ونظرًا للتعبير القوي والموثوق به لإشارات Wnt-3A، يُستخدم خط الخلايا L Wnt-3A على نطاق واسع في المختبرات لاستكشاف تأثيرات إشارات Wnt على العمليات الخلوية المختلفة. إنه مورد لا غنى عنه للعلماء الذين يهدفون إلى كشف تعقيدات الوظائف الخلوية بوساطة Wnt وتطوير استراتيجيات جديدة لتعديل هذا المسار في سياقات المرض.

الأنسجة
النسيج الضام تحت الجلد، والنسيج الضام تحت الجلد، والأروية والشحمية
المرادفات
  • L-Wnt-3A
  • L-Wnt3A
  • LWnt3A
  • LWnt-3A

02التصنيف

كائن حي
الماوس
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1
تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1: This murine L-cell-derived line (L Wnt-3A) contains a Wnt3a expression construct under PGK promoter control with neomycin resistance, enabling secretion of Wnt3a. The insert is stably integrated into L-cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الأرومة الليفية

04المعرّفات

المرجع
L Wnt-3A (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305184)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10090
سيلوصور
CVCL_0635

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير البروتيني
Wnt-3A

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
أضف إلى الوسط 10٪ FBS، 0.4 ملغم/مل من G-418
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

السلالة / النوع الفرعي
ج 3 هـ/ع
عمر المتبرع
100 يوم