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- Tissue
- Tejido conectivo subcutáneo, areolar y adiposo
- Synonyms
- L-Wnt-3A, L-Wnt3A, LWnt3A, LWnt-3A
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L Wnt-3A
Cell line · Product number 305184
The L Wnt-3A cell line is a derivative of the L cells, originally derived from mouse fibroblast cells. This cell line is specifically engineered to stably...
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01General information
- Description
La línea celular L Wnt-3A es un derivado de las células L, que a su vez se originaron a partir de fibroblastos de ratón. Esta línea celular ha sido diseñada específicamente para expresar de manera estable la proteína Wnt-3A, un componente fundamental de la vía de señalización Wnt. La señalización Wnt es crucial para diversos procesos de desarrollo, entre ellos la proliferación, la diferenciación y la migración celular. La expresión estable de Wnt-3A en esta línea celular la convierte en una herramienta valiosa para estudiar los mecanismos moleculares que subyacen a estos procesos biológicos, particularmente en el contexto de la investigación del cáncer, la regeneración de tejidos y el desarrollo embrionario.
Los investigadores suelen utilizar la línea celular L Wnt-3A para producir un medio acondicionado rico en Wnt-3A, que luego puede utilizarse para activar la señalización Wnt en otros tipos de células. Esta aplicación resulta especialmente beneficiosa en el estudio de la biología de las células madre y la medicina regenerativa, donde la señalización Wnt desempeña un papel fundamental en el mantenimiento de la pluripotencia de las células madre y en la promoción de la reparación tisular. Además, la línea celular sirve como modelo para investigar la desregulación de la señalización Wnt en diversos tipos de cáncer, lo que brinda información sobre posibles dianas terapéuticas y tratamientos.
Debido a la expresión robusta y confiable de Wnt-3A, la línea celular L Wnt-3A se utiliza ampliamente en laboratorios para explorar los efectos de la señalización Wnt en diferentes procesos celulares. Es un recurso indispensable para los científicos que buscan desentrañar las complejidades de las funciones celulares mediadas por Wnt y desarrollar estrategias novedosas para modular esta vía en contextos de enfermedad.
- Tissue
- Tejido conectivo subcutáneo, areolar y adiposo
- Synonyms
- L-Wnt-3A
- L-Wnt3A
- LWnt3A
- LWnt-3A
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This murine L-cell-derived line (L Wnt-3A) contains a Wnt3a expression construct under PGK promoter control with neomycin resistance, enabling secretion of Wnt3a. The insert is stably integrated into L-cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- Fibroblasto
04Identifiers
- Citation
- L Wnt-3A (número de catálogo de Cytion 305184)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_0635
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- Wnt-3A
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, p/v: 4,5 g/L de glucosa, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sodio (número de artículo de Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
- Supplements
- Añada al medio un 10 % de FBS y 0,4 mg/mL de G-418
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
- Fluid renewal
- De 2 a 3 veces por semana
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.
Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.
- Freeze medium
- Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
- Storage conditions
Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.
- Shipping conditions
Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
08Donor
- Breed / subspecies
- C3H/An
- Donor age
- 100 días
09Legal and safety
- Safety precautions
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su descongelación futura, es obligatorio cumplir con estrictas medidas de seguridad. Es esencial contar con guantes y ropa de protección adecuados, y se requiere el uso de una mascarilla o lentes de seguridad durante la transferencia de muestras congeladas hacia o desde el tanque de nitrógeno líquido. Esto tiene como objetivo mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones de los criotubos al retirarlos, lo que puede provocar la proyección de fragmentos afilados.
- Warranty
En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.
Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.
- Material Transfer Agreement required
- Yes