Skip to content
L Wnt-3A
Tissue
เนื้อเยื่อเกี่ยวพันใต้ผิวหนัง, เนื้อเยื่อฐานและไขมัน
Synonyms
L-Wnt-3A, L-Wnt3A, LWnt3A, LWnt-3A

Documents

L Wnt-3A

Cell line · Product number 305184

The L Wnt-3A cell line is a derivative of the L cells, originally derived from mouse fibroblast cells. This cell line is specifically engineered to stably...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

สายพันธุ์เซลล์ L Wnt-3A เป็นอนุพันธ์ของเซลล์ L ซึ่งเดิมได้มาจากเซลล์ไฟโบรบลาสต์ของหนู สายพันธุ์เซลล์นี้ถูกออกแบบทางพันธุกรรมโดยเฉพาะเพื่อให้สามารถแสดงออกโปรตีน Wnt-3A ได้อย่างคงที่ ซึ่งเป็นองค์ประกอบสำคัญของเส้นทางการส่งสัญญาณ Wntการส่งสัญญาณ Wnt มีความสำคัญอย่างยิ่งต่อกระบวนการพัฒนาต่างๆ รวมถึงการเพิ่มจำนวนเซลล์ การเปลี่ยนแปลงของเซลล์ และการเคลื่อนที่ การแสดงออกที่คงที่ของ Wnt-3A ในสายเซลล์นี้ทำให้เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาเชิงกลไกโมเลกุลที่อยู่เบื้องหลังกระบวนการทางชีวภาพเหล่านี้ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในบริบทของการวิจัยมะเร็ง การฟื้นฟูเนื้อเยื่อ และการพัฒนาตัวอ่อน

นักวิจัยมักใช้สายพันธุ์เซลล์ L Wnt-3A ในการผลิตอาหารเลี้ยงเซลล์ที่อุดมไปด้วย Wnt-3A ซึ่งสามารถนำไปใช้กระตุ้นการส่งสัญญาณ Wnt ในเซลล์ชนิดอื่น ๆ ได้ การประยุกต์ใช้นี้มีประโยชน์อย่างยิ่งในการศึกษาชีววิทยาของเซลล์ต้นกำเนิดและเวชศาสตร์ฟื้นฟู ซึ่งการส่งสัญญาณ Wnt มีบทบาทสำคัญในการรักษาความสามารถในการเปลี่ยนแปลงของเซลล์ต้นกำเนิดและการซ่อมแซมเนื้อเยื่อนอกจากนี้ สายเซลล์นี้ยังทำหน้าที่เป็นแบบจำลองในการศึกษาความผิดปกติของการส่งสัญญาณ Wnt ในมะเร็งชนิดต่างๆ ซึ่งให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับเป้าหมายการรักษาและแนวทางการรักษาที่เป็นไปได้

เนื่องจากการแสดงออกของ Wnt-3A ที่แข็งแกร่งและเชื่อถือได้ สายเซลล์ L Wnt-3A จึงถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในห้องปฏิบัติการเพื่อศึกษาผลกระทบของสัญญาณ Wnt ต่อกระบวนการเซลล์ต่าง ๆ ถือเป็นทรัพยากรที่ขาดไม่ได้สำหรับนักวิทยาศาสตร์ที่ต้องการไขความซับซ้อนของหน้าที่เซลล์ที่ควบคุมโดย Wnt และพัฒนาวิธีการใหม่ ๆ ในการปรับเส้นทางนี้ในบริบทของโรค

Tissue
เนื้อเยื่อเกี่ยวพันใต้ผิวหนัง, เนื้อเยื่อฐานและไขมัน
Synonyms
  • L-Wnt-3A
  • L-Wnt3A
  • LWnt3A
  • LWnt-3A

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This murine L-cell-derived line (L Wnt-3A) contains a Wnt3a expression construct under PGK promoter control with neomycin resistance, enabling secretion of Wnt3a. The insert is stably integrated into L-cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ไฟโบรบลาสต์

04Identifiers

Citation
L Wnt-3A (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305184)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0635

05Expression and susceptibility

Protein expression
Wnt-3A

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมสารอาหารเสริมลงในอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%, G-418 0.4 มก./มล.
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
ซี3เอช/แอน
Donor age
100 วัน