.jpg)
- Audums
- Zemādas saistaudi, areolārie un taukaudi
- Sinonīmi
- L-Wnt-3A, L-Wnt3A, LWnt3A, LWnt-3A
Dokumenti
L Wnt-3A
Cell line · Preces numurs 305184
The L Wnt-3A cell line is a derivative of the L cells, originally derived from mouse fibroblast cells. This cell line is specifically engineered to stably...
Pielāgošana / Ieteikumi
- L Wnt-3ACell line€430.00
Ieteicams (jaunākā partija)
01Vispārīga informācija
- Apraksts
L Wnt-3A šūnu līnija ir L šūnu atvasinājums, kas sākotnēji iegūta no peļu fibroblastu šūnām. Šī šūnu līnija ir īpaši izstrādāta, lai stabili ekspresētu Wnt-3A olbaltumvielu, kas ir Wnt signalizācijas ceļa būtiska sastāvdaļa. Wnt signalizācijai ir būtiska nozīme dažādos attīstības procesos, tostarp šūnu proliferācijā, diferenciācijā un migrācijā. Stabilā Wnt-3A ekspresija šajā šūnu līnijā padara to par vērtīgu instrumentu šo bioloģisko procesu pamatā esošo molekulāro mehānismu izpētei, jo īpaši vēža, audu reģenerācijas un embriju attīstības pētījumu kontekstā.
Pētnieki bieži izmanto L Wnt-3A šūnu līniju, lai iegūtu kondicionētu barotni, kas bagāta ar Wnt-3A, kuru pēc tam var izmantot, lai aktivizētu Wnt signālu citos šūnu tipos. Šis pielietojums ir īpaši noderīgs cilmes šūnu bioloģijas un reģeneratīvās medicīnas pētījumos, kur Wnt signalizācijai ir galvenā loma cilmes šūnu pluripotences uzturēšanā un audu atjaunošanas veicināšanā. Turklāt šūnu līnija kalpo kā modelis, lai pētītu Wnt signalizācijas disregulāciju dažādos vēža veidos, sniedzot ieskatu par potenciālajiem terapeitiskajiem mērķiem un ārstēšanu.
Pateicoties spēcīgai un uzticamai Wnt-3A ekspresijai, L Wnt-3A šūnu līniju plaši izmanto laboratorijās, lai pētītu Wnt signalizācijas ietekmi uz dažādiem šūnu procesiem. Tā ir neaizstājams resurss zinātniekiem, kuru mērķis ir atklāt Wnt mediēto šūnu funkciju sarežģītību un izstrādāt jaunas stratēģijas šī ceļa modulēšanai slimību kontekstā.
- Audums
- Zemādas saistaudi, areolārie un taukaudi
- Sinonīmi
- L-Wnt-3A
- L-Wnt3A
- LWnt3A
- LWnt-3A
02Klasifikācija
- Organisms
- Pele
- Sekss
- Vīrietis
- Augšanas īpašības
- Atbalstītājs
- ĢMO statuss
- GMO-S1
- Sīkāka informācija par ĢMO statusu
- GMO-S1: This murine L-cell-derived line (L Wnt-3A) contains a Wnt3a expression construct under PGK promoter control with neomycin resistance, enabling secretion of Wnt3a. The insert is stably integrated into L-cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 1
03Raksturlielumi
- Morfoloģija
- Fibroblasti
04Identifikatori
- Atsauce
- L Wnt-3A (Cytion kataloga numurs 305184)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_0635
05Pazīmes un uzņēmība
- Proteīnu ekspresija
- Wnt-3A
06Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildiniet barotni ar 10% FBS, 0,4 mg/ml G-418
- Disociācijas reaģents
- Accutase
- Pārstādīšana
- Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
- Šķidruma atjaunošana
- 2 līdz 3 reizes nedēļā
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Sterilitāte
Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.
Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
08Ziedotājs
- Šķirne / pasuga
- C3H/An
- Donora vecums
- 100 dienas
09Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Nepieciešams materiālu nodošanas līgums
- Jā