Pāriet uz saturu
L Wnt-3A
Audums
Zemādas saistaudi, areolārie un taukaudi
Sinonīmi
L-Wnt-3A, L-Wnt3A, LWnt3A, LWnt-3A

Dokumenti

L Wnt-3A

Cell line · Preces numurs 305184

The L Wnt-3A cell line is a derivative of the L cells, originally derived from mouse fibroblast cells. This cell line is specifically engineered to stably...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

L Wnt-3A šūnu līnija ir L šūnu atvasinājums, kas sākotnēji iegūta no peļu fibroblastu šūnām. Šī šūnu līnija ir īpaši izstrādāta, lai stabili ekspresētu Wnt-3A olbaltumvielu, kas ir Wnt signalizācijas ceļa būtiska sastāvdaļa. Wnt signalizācijai ir būtiska nozīme dažādos attīstības procesos, tostarp šūnu proliferācijā, diferenciācijā un migrācijā. Stabilā Wnt-3A ekspresija šajā šūnu līnijā padara to par vērtīgu instrumentu šo bioloģisko procesu pamatā esošo molekulāro mehānismu izpētei, jo īpaši vēža, audu reģenerācijas un embriju attīstības pētījumu kontekstā.

Pētnieki bieži izmanto L Wnt-3A šūnu līniju, lai iegūtu kondicionētu barotni, kas bagāta ar Wnt-3A, kuru pēc tam var izmantot, lai aktivizētu Wnt signālu citos šūnu tipos. Šis pielietojums ir īpaši noderīgs cilmes šūnu bioloģijas un reģeneratīvās medicīnas pētījumos, kur Wnt signalizācijai ir galvenā loma cilmes šūnu pluripotences uzturēšanā un audu atjaunošanas veicināšanā. Turklāt šūnu līnija kalpo kā modelis, lai pētītu Wnt signalizācijas disregulāciju dažādos vēža veidos, sniedzot ieskatu par potenciālajiem terapeitiskajiem mērķiem un ārstēšanu.

Pateicoties spēcīgai un uzticamai Wnt-3A ekspresijai, L Wnt-3A šūnu līniju plaši izmanto laboratorijās, lai pētītu Wnt signalizācijas ietekmi uz dažādiem šūnu procesiem. Tā ir neaizstājams resurss zinātniekiem, kuru mērķis ir atklāt Wnt mediēto šūnu funkciju sarežģītību un izstrādāt jaunas stratēģijas šī ceļa modulēšanai slimību kontekstā.

Audums
Zemādas saistaudi, areolārie un taukaudi
Sinonīmi
  • L-Wnt-3A
  • L-Wnt3A
  • LWnt3A
  • LWnt-3A

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This murine L-cell-derived line (L Wnt-3A) contains a Wnt3a expression construct under PGK promoter control with neomycin resistance, enabling secretion of Wnt3a. The insert is stably integrated into L-cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Fibroblasti

04Identifikatori

Atsauce
L Wnt-3A (Cytion kataloga numurs 305184)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_0635

05Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
Wnt-3A

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildiniet barotni ar 10% FBS, 0,4 mg/ml G-418
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
C3H/An
Donora vecums
100 dienas