Перейти до вмісту
L Wnt-3A
Тканина
Підшкірна сполучна тканина, ареолярна та жирова
Синоніми
L-Wnt-3A, L-Wnt3A, LWnt3A, LWnt-3A

Документи

L Wnt-3A

Cell line · Номер товару 305184

The L Wnt-3A cell line is a derivative of the L cells, originally derived from mouse fibroblast cells. This cell line is specifically engineered to stably...

€430.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія L Wnt-3A є похідною клітин L, отриманих з клітин фібробластів миші. Ця лінія клітин спеціально сконструйована для стабільної експресії білка Wnt-3A, критично важливого компонента сигнального шляху Wnt. Сигналізація Wnt має вирішальне значення для різних процесів розвитку, включаючи проліферацію, диференціацію та міграцію клітин. Стабільна експресія Wnt-3A в цій клітинній лінії робить її цінним інструментом для вивчення молекулярних механізмів, що лежать в основі цих біологічних процесів, особливо в контексті дослідження раку, регенерації тканин та ембріонального розвитку.

Дослідники часто використовують клітинну лінію L Wnt-3A для отримання умовного середовища, багатого на Wnt-3A, яке потім можна використовувати для активації сигналізації Wnt в інших типах клітин. Таке застосування особливо корисне для вивчення біології стовбурових клітин і регенеративної медицини, де сигналізація Wnt відіграє ключову роль у підтримці плюрипотентності стовбурових клітин і сприянні відновленню тканин. Крім того, клітинна лінія слугує моделлю для дослідження порушення регуляції сигналізації Wnt при різних видах раку, що дає уявлення про потенційні терапевтичні мішені та методи лікування.

Завдяки сильній і надійній експресії Wnt-3A, клітинна лінія L Wnt-3A широко використовується в лабораторіях для вивчення впливу сигналізації Wnt на різні клітинні процеси. Це незамінний ресурс для вчених, які прагнуть розгадати складність Wnt-опосередкованих клітинних функцій та розробити нові стратегії для модуляції цього шляху в контексті захворювань.

Тканина
Підшкірна сполучна тканина, ареолярна та жирова
Синоніми
  • L-Wnt-3A
  • L-Wnt3A
  • LWnt3A
  • LWnt-3A

02Класифікація

Організм
Миша
Секс
Чоловік
Характеристики росту
Прихильник
Статус ГМО
GMO-S1
Детальна інформація щодо статусу ГМО
GMO-S1: This murine L-cell-derived line (L Wnt-3A) contains a Wnt3a expression construct under PGK promoter control with neomycin resistance, enabling secretion of Wnt3a. The insert is stably integrated into L-cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Фібробласт

04Ідентифікатори

Посилання
L Wnt-3A (номер у каталозі Cytion 305184)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
10090
Целозавр
CVCL_0635

05Експресія та сприйнятливість

Експресія білків
Wnt-3A

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
ДМЕМ, w: 4,5 г/л Глюкоза, w: 4 мМ L-глутамін, w: 3,7 г/л NaHCO3, w: 1,0 мМ піруват натрію (цит. номер 820300a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS, 0,4 мг/мл G-418
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Порода / підвид
C3H/An
Вік донора
100 днів