Siirry sisältöön
L Wnt-3A
Kudos
Ihonalainen sidekudos, areolaarinen ja rasvakudos
Synonyymit
L-Wnt-3A, L-Wnt3A, LWnt3A, LWnt-3A

Asiakirjat

L Wnt-3A

Cell line · Tuotenumero 305184

The L Wnt-3A cell line is a derivative of the L cells, originally derived from mouse fibroblast cells. This cell line is specifically engineered to stably...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

L Wnt-3A-solulinja on alun perin hiiren fibroblastisoluista peräisin olevien L-solujen johdannainen. Tämä solulinja on erityisesti suunniteltu ilmentämään vakaasti Wnt-3A-proteiinia, joka on Wnt-signalointireitin kriittinen komponentti. Wnt-signalointi on ratkaisevan tärkeää erilaisille kehitysprosesseille, kuten solujen proliferaatiolle, erilaistumiselle ja migraatiolle. Wnt-3A:n vakaa ilmentyminen tässä solulinjassa tekee siitä arvokkaan välineen näiden biologisten prosessien taustalla olevien molekyylimekanismien tutkimiseen erityisesti syöpätutkimuksen, kudosten regeneraation ja alkionkehityksen yhteydessä.

Tutkijat käyttävät L Wnt-3A-solulinjaa usein tuottamaan runsaasti Wnt-3A:ta sisältävää ehdollistettua väliaineita, joita voidaan sitten käyttää Wnt-signalisaation aktivoimiseen muissa solutyypeissä. Tämä sovellus on erityisen hyödyllinen kantasolubiologian ja regeneratiivisen lääketieteen tutkimuksessa, jossa Wnt-signalointi on keskeisessä asemassa kantasolujen pluripotenssin ylläpitämisessä ja kudosten korjautumisen edistämisessä. Lisäksi solulinja toimii mallina, jolla tutkitaan Wnt-signaloinnin säätelyhäiriöitä erilaisissa syövissä, mikä antaa tietoa mahdollisista terapeuttisista kohteista ja hoidoista.

Wnt-3A:n vankan ja luotettavan ilmentymisen ansiosta L Wnt-3A-solulinjaa käytetään laajalti laboratorioissa, joissa tutkitaan Wnt-signaloinnin vaikutuksia erilaisiin soluprosesseihin. Se on korvaamaton resurssi tutkijoille, jotka pyrkivät selvittämään Wnt-välitteisten solutoimintojen monimutkaisuutta ja kehittämään uusia strategioita tämän reitin muokkaamiseksi sairauksien yhteydessä.

Kudos
Ihonalainen sidekudos, areolaarinen ja rasvakudos
Synonyymit
  • L-Wnt-3A
  • L-Wnt3A
  • LWnt3A
  • LWnt-3A

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This murine L-cell-derived line (L Wnt-3A) contains a Wnt3a expression construct under PGK promoter control with neomycin resistance, enabling secretion of Wnt3a. The insert is stably integrated into L-cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Fibroblastit

04Tunnisteet

Lähdeviite
L Wnt-3A (Cytionin tuotenumero 305184)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_0635

05Ilmentyminen ja alttius

Proteiinin ilmentyminen
Wnt-3A

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä, 0,4 mg/ml G-418:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
C3H/An
Luovuttajan ikä
100 päivää