Pereiti prie turinio
L Wnt-3A
Audinys
Poodinis jungiamasis audinys, areolinis ir riebalinis audiniai
Sinonimai
L-Wnt-3A, L-Wnt3A, LWnt3A, LWnt-3A

Dokumentai

L Wnt-3A

Cell line · Prekės numeris 305184

The L Wnt-3A cell line is a derivative of the L cells, originally derived from mouse fibroblast cells. This cell line is specifically engineered to stably...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

L Wnt-3A ląstelių linija yra L ląstelių, iš pradžių gautų iš pelių fibroblastų ląstelių, darinys. Ši ląstelių linija specialiai sukurta taip, kad stabiliai ekspresuotų Wnt-3A baltymą - svarbiausią Wnt signalų kelio komponentą. Wnt signalai yra labai svarbūs įvairiems vystymosi procesams, įskaitant ląstelių proliferaciją, diferenciaciją ir migraciją. Stabili Wnt-3A raiška šioje ląstelių linijoje yra vertingas įrankis tiriant šiuos biologinius procesus lemiančius molekulinius mechanizmus, ypač vėžio tyrimų, audinių regeneracijos ir embriono vystymosi kontekste.

Mokslininkai dažnai naudoja L Wnt-3A ląstelių liniją, kad pagamintų sąlyginę terpę, kurioje gausu Wnt-3A, ir kuri vėliau gali būti naudojama Wnt signalams aktyvuoti kitų tipų ląstelėse. Tai ypač naudinga kamieninių ląstelių biologijos ir regeneracinės medicinos tyrimuose, kur Wnt signalas atlieka pagrindinį vaidmenį palaikant kamieninių ląstelių pluripotentiškumą ir skatinant audinių atstatymą. Be to, ši ląstelių linija naudojama kaip modelis Wnt signalų reguliacijos sutrikimams įvairiose vėžio formose tirti, o tai padeda nustatyti galimus terapinius taikinius ir gydymo būdus.

Dėl stiprios ir patikimos Wnt-3A raiškos L Wnt-3A ląstelių linija plačiai naudojama laboratorijose tiriant Wnt signalų poveikį įvairiems ląstelių procesams. Tai nepakeičiamas šaltinis mokslininkams, siekiantiems išsiaiškinti sudėtingas Wnt tarpininkaujamų ląstelių funkcijas ir kurti naujas šio kelio moduliavimo strategijas ligų atvejais.

Audinys
Poodinis jungiamasis audinys, areolinis ir riebalinis audiniai
Sinonimai
  • L-Wnt-3A
  • L-Wnt3A
  • LWnt3A
  • LWnt-3A

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This murine L-cell-derived line (L Wnt-3A) contains a Wnt3a expression construct under PGK promoter control with neomycin resistance, enabling secretion of Wnt3a. The insert is stably integrated into L-cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Fibroblastai

04Identifikatoriai

Nuoroda
L Wnt-3A (Cytion katalogo numeris 305184)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_0635

05Išraiška ir jautrumas

Baltojų baltymų ekspresija
Wnt-3A

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS, 0,4 mg/ml G-418
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Veislė / porūšis
C3H/An
Donoro amžius
100 dienų