Skip to content
L Wnt-3A
Tissue
Mô liên kết dưới da, mô liên kết lỏng lẻo và mô mỡ
Synonyms
L-Wnt-3A, L-Wnt3A, LWnt3A, LWnt-3A

Documents

L Wnt-3A

Cell line · Product number 305184

The L Wnt-3A cell line is a derivative of the L cells, originally derived from mouse fibroblast cells. This cell line is specifically engineered to stably...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào L Wnt-3A là một biến thể của dòng tế bào L, ban đầu được phân lập từ tế bào sợi của chuột. Dòng tế bào này được thiết kế đặc biệt để biểu hiện ổn định protein Wnt-3A, một thành phần quan trọng của con đường tín hiệu Wnt. Tín hiệu Wnt đóng vai trò quan trọng trong nhiều quá trình phát triển, bao gồm sự phân chia, biệt hóa và di chuyển của tế bào. Việc biểu hiện ổn định protein Wnt-3A trong dòng tế bào này khiến nó trở thành công cụ quý giá để nghiên cứu các cơ chế phân tử cơ bản của các quá trình sinh học này, đặc biệt trong lĩnh vực nghiên cứu ung thư, tái tạo mô và phát triển phôi.

Các nhà nghiên cứu thường sử dụng dòng tế bào L Wnt-3A để sản xuất môi trường nuôi cấy giàu Wnt-3A, có thể được sử dụng để kích hoạt tín hiệu Wnt trong các loại tế bào khác. Ứng dụng này đặc biệt hữu ích trong nghiên cứu sinh học tế bào gốc và y học tái tạo, nơi tín hiệu Wnt đóng vai trò quan trọng trong việc duy trì khả năng đa tiềm năng của tế bào gốc và thúc đẩy quá trình sửa chữa mô. Ngoài ra, dòng tế bào này còn được sử dụng làm mô hình để nghiên cứu sự rối loạn tín hiệu Wnt trong các loại ung thư khác nhau, cung cấp những hiểu biết về các mục tiêu điều trị tiềm năng và phương pháp điều trị.

Do khả năng biểu hiện mạnh mẽ và đáng tin cậy của Wnt-3A, dòng tế bào L Wnt-3A được sử dụng rộng rãi trong các phòng thí nghiệm để nghiên cứu tác động của tín hiệu Wnt đối với các quá trình tế bào khác nhau. Đây là một nguồn tài nguyên không thể thiếu cho các nhà khoa học nhằm giải mã sự phức tạp của các chức năng tế bào do Wnt điều hòa và phát triển các chiến lược mới để điều chỉnh con đường này trong bối cảnh bệnh lý.

Tissue
Mô liên kết dưới da, mô liên kết lỏng lẻo và mô mỡ
Synonyms
  • L-Wnt-3A
  • L-Wnt3A
  • LWnt3A
  • LWnt-3A

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This murine L-cell-derived line (L Wnt-3A) contains a Wnt3a expression construct under PGK promoter control with neomycin resistance, enabling secretion of Wnt3a. The insert is stably integrated into L-cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tế bào sợi

04Identifiers

Citation
L Wnt-3A (mã sản phẩm Cytion 305184)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0635

05Expression and susceptibility

Protein expression
Wnt-3A

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, chứa: 4,5 g/L glucose, chứa: 4 mM L-glutamine, chứa: 3,7 g/L NaHCO₃, chứa: 1,0 mM natri pyruvate (số hiệu sản phẩm Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung vào môi trường nuôi cấy 10% huyết thanh bò (FBS) và 0,4 mg/mL G-418
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Breed / subspecies
C3H/An
Donor age
100 ngày