Gå direkte til indholdet
L Wnt-3A
Væv
Subkutant bindevæv, areolært væv og fedtvæv
Synonymer
L-Wnt-3A, L-Wnt3A, LWnt3A, LWnt-3A

Dokumenter

L Wnt-3A

Cell line · Varenummer 305184

The L Wnt-3A cell line is a derivative of the L cells, originally derived from mouse fibroblast cells. This cell line is specifically engineered to stably...

€430.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

L Wnt-3A-cellelinjen er et derivat af L-cellerne, der oprindeligt stammer fra musefibroblastceller. Denne cellelinje er specifikt konstrueret til stabilt at udtrykke Wnt-3A-proteinet, en kritisk komponent i Wnt-signalvejen. Wnt-signalering er afgørende for forskellige udviklingsprocesser, herunder celleproliferation, differentiering og migration. Det stabile udtryk af Wnt-3A i denne cellelinje gør den til et værdifuldt værktøj til at studere de molekylære mekanismer, der ligger til grund for disse biologiske processer, især i forbindelse med kræftforskning, vævsregenerering og embryonal udvikling.

Forskere bruger ofte L Wnt-3A-cellelinjen til at producere konditioneret medium rigt på Wnt-3A, som derefter kan bruges til at aktivere Wnt-signalering i andre celletyper. Denne anvendelse er især gavnlig i studiet af stamcellebiologi og regenerativ medicin, hvor Wnt-signalering spiller en central rolle i opretholdelsen af stamcellepluripotens og fremme af vævsreparation. Derudover fungerer cellelinjen som en model til at undersøge dysreguleringen af Wnt-signalering i forskellige kræftformer, hvilket giver indsigt i potentielle terapeutiske mål og behandlinger.

På grund af det robuste og pålidelige udtryk af Wnt-3A bruges L Wnt-3A-cellelinjen i vid udstrækning i laboratorier til at udforske virkningerne af Wnt-signalering på forskellige cellulære processer. Den er en uundværlig ressource for forskere, der ønsker at afdække kompleksiteten i Wnt-medierede cellulære funktioner og udvikle nye strategier til at modulere denne signalvej i sygdomssammenhænge.

Væv
Subkutant bindevæv, areolært væv og fedtvæv
Synonymer
  • L-Wnt-3A
  • L-Wnt3A
  • LWnt3A
  • LWnt-3A

02Klassificering

Organisme
Mus
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This murine L-cell-derived line (L Wnt-3A) contains a Wnt3a expression construct under PGK promoter control with neomycin resistance, enabling secretion of Wnt3a. The insert is stably integrated into L-cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Fibroblast

04Identifikatorer

Kildehenvisning
L Wnt-3A (Cytion-katalognummer 305184)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0635

05Udtryk og modtagelighed

Proteinekspression
Wnt-3A

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10 % FBS, 0,4 mg/mL G-418
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Race / underart
C3H/An
Donorens alder
100 dage