Gå til innholdet
L Wnt-3A
Vev
Subkutant bindevev, areolært vev og fettvev
Synonymer
L-Wnt-3A, L-Wnt3A, LWnt3A, LWnt-3A

Dokumenter

L Wnt-3A

Cell line · Produktnummer 305184

The L Wnt-3A cell line is a derivative of the L cells, originally derived from mouse fibroblast cells. This cell line is specifically engineered to stably...

€430.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

L Wnt-3A-cellelinjen er et derivat av L-celler, som opprinnelig stammer fra fibroblastceller fra mus. Denne cellelinjen er spesielt konstruert for å uttrykke Wnt-3A-proteinet, en kritisk komponent i Wnt-signalveien. Wnt-signalering er avgjørende for en rekke utviklingsprosesser, inkludert celleproliferasjon, differensiering og migrasjon. Det stabile uttrykket av Wnt-3A i denne cellelinjen gjør den til et verdifullt verktøy for å studere de molekylære mekanismene som ligger til grunn for disse biologiske prosessene, særlig i forbindelse med kreftforskning, vevsregenerering og embryonalutvikling.

Forskere bruker ofte L Wnt-3A-cellelinjen til å produsere kondisjonert medium rikt på Wnt-3A, som deretter kan brukes til å aktivere Wnt-signalering i andre celletyper. Dette er spesielt nyttig i studier av stamcellebiologi og regenerativ medisin, der Wnt-signalering spiller en sentral rolle når det gjelder å opprettholde stamcellenes pluripotens og fremme reparasjon av vev. I tillegg fungerer cellelinjen som en modell for å undersøke dysregulering av Wnt-signalering i ulike kreftformer, noe som gir innsikt i potensielle terapeutiske mål og behandlingsformer.

På grunn av det robuste og pålitelige uttrykket av Wnt-3A er L Wnt-3A-cellelinjen mye brukt i laboratorier for å utforske effekten av Wnt-signalering på ulike cellulære prosesser. Den er en uunnværlig ressurs for forskere som ønsker å avdekke kompleksiteten i Wnt-medierte cellulære funksjoner og utvikle nye strategier for å modulere denne signalveien i sykdomssammenheng.

Vev
Subkutant bindevev, areolært vev og fettvev
Synonymer
  • L-Wnt-3A
  • L-Wnt3A
  • LWnt3A
  • LWnt-3A

02Klassifisering

Organisme
Mus
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This murine L-cell-derived line (L Wnt-3A) contains a Wnt3a expression construct under PGK promoter control with neomycin resistance, enabling secretion of Wnt3a. The insert is stably integrated into L-cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Fibroblast

04Identifikatorer

Kildehenvisning
L Wnt-3A (Cytion katalognummer 305184)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0635

05Uttrykk og mottakelighet

Proteinekspresjon
Wnt-3A

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS, 0,4 mg/mL G-418
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Rase / underart
C3H/An
Donorens alder
100 dager