Przejdź do treści
L Wnt-3A
Chusteczka
Podskórna tkanka łączna, otoczkowa i tłuszczowa
Synonimy
L-Wnt-3A, L-Wnt3A, LWnt3A, LWnt-3A

Dokumenty

L Wnt-3A

Cell line · Numer produktu 305184

The L Wnt-3A cell line is a derivative of the L cells, originally derived from mouse fibroblast cells. This cell line is specifically engineered to stably...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa L Wnt-3A jest pochodną komórek L, pierwotnie pochodzących z mysich komórek fibroblastów. Ta linia komórkowa jest specjalnie zaprojektowana do stabilnej ekspresji białka Wnt-3A, krytycznego składnika szlaku sygnałowego Wnt. Sygnalizacja Wnt ma kluczowe znaczenie dla różnych procesów rozwojowych, w tym proliferacji, różnicowania i migracji komórek. Stabilna ekspresja Wnt-3A w tej linii komórkowej czyni ją cennym narzędziem do badania mechanizmów molekularnych leżących u podstaw tych procesów biologicznych, szczególnie w kontekście badań nad rakiem, regeneracją tkanek i rozwojem embrionalnym.

Naukowcy często wykorzystują linię komórkową L Wnt-3A do produkcji pożywki kondycjonowanej bogatej w Wnt-3A, którą można następnie wykorzystać do aktywacji sygnalizacji Wnt w innych typach komórek. To zastosowanie jest szczególnie korzystne w badaniach nad biologią komórek macierzystych i medycyną regeneracyjną, gdzie sygnalizacja Wnt odgrywa kluczową rolę w utrzymaniu pluripotencji komórek macierzystych i promowaniu naprawy tkanek. Ponadto linia komórkowa służy jako model do badania dysregulacji sygnalizacji Wnt w różnych nowotworach, zapewniając wgląd w potencjalne cele terapeutyczne i metody leczenia.

Ze względu na silną i niezawodną ekspresję Wnt-3A, linia komórkowa L Wnt-3A jest szeroko stosowana w laboratoriach do badania wpływu sygnalizacji Wnt na różne procesy komórkowe. Jest to niezbędne źródło informacji dla naukowców, którzy chcą rozwikłać złożoność funkcji komórkowych, w których pośredniczy Wnt i opracować nowe strategie modulowania tego szlaku w kontekście chorób.

Chusteczka
Podskórna tkanka łączna, otoczkowa i tłuszczowa
Synonimy
  • L-Wnt-3A
  • L-Wnt3A
  • LWnt3A
  • LWnt-3A

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
GMO-S1
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S1: This murine L-cell-derived line (L Wnt-3A) contains a Wnt3a expression construct under PGK promoter control with neomycin resistance, enabling secretion of Wnt3a. The insert is stably integrated into L-cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Fibroblast

04Identyfikatory

Źródło
L Wnt-3A (numer katalogowy Cytion 305184)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0635

05Ekspresja i podatność

Ekspresja białek
Wnt-3A

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS, 0,4 mg/ml G-418
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Rasa / podgatunek
C3H/An
Wiek dawcy
100 dni