Skip to content
L Wnt-3A
Tissue
רקמת חיבור תת-עורית, רקמת שד ורקמת שומן
Synonyms
L-Wnt-3A, L-Wnt3A, LWnt3A, LWnt-3A

Documents

L Wnt-3A

Cell line · Product number 305184

The L Wnt-3A cell line is a derivative of the L cells, originally derived from mouse fibroblast cells. This cell line is specifically engineered to stably...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים L Wnt-3A הוא נגזרת של תאי L, שמקורם בתאי פיברובלסט של עכברים. קו תאים זה תוכנן במיוחד כדי לבטא באופן יציב את החלבון Wnt-3A, מרכיב קריטי במסלול האיתות Wnt. איתות Wnt הוא חיוני לתהליכי התפתחות שונים, כולל התרבות תאים, התמיינות ונדידה. הביטוי היציב של Wnt-3A בקו תאים זה הופך אותו לכלי חשוב לחקר המנגנונים המולקולריים העומדים בבסיס תהליכים ביולוגיים אלה, במיוחד בהקשר של מחקר הסרטן, התחדשות רקמות והתפתחות עוברית.

חוקרים מרבים להשתמש בקו התאים L Wnt-3A לייצור מצע מותנה עשיר ב-Wnt-3A, אשר ניתן להשתמש בו להפעלת מסלול Wnt בסוגים אחרים של תאים. יישום זה מועיל במיוחד בחקר ביולוגיה של תאי גזע ורפואה רגנרטיבית, שבהם מסלול Wnt ממלא תפקיד מרכזי בשמירה על פלוריפוטנטיות של תאי גזע ובקידום תיקון רקמות. בנוסף, קו התאים משמש כמודל לחקר חוסר הסדירות באיתות Wnt בסוגים שונים של סרטן, ומספק תובנות לגבי מטרות טיפוליות וטיפולים פוטנציאליים.

בזכות הביטוי החזק והאמין של Wnt-3A, קו התאים L Wnt-3A נמצא בשימוש נרחב במעבדות לחקר ההשפעות של איתות Wnt על תהליכים תאיים שונים. זהו משאב חיוני עבור מדענים המבקשים לפענח את המורכבות של תפקודים תאיים המתווכים על ידי Wnt ולפתח אסטרטגיות חדשות לוויסות מסלול זה בהקשרים של מחלות.

Tissue
רקמת חיבור תת-עורית, רקמת שד ורקמת שומן
Synonyms
  • L-Wnt-3A
  • L-Wnt3A
  • LWnt3A
  • LWnt-3A

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This murine L-cell-derived line (L Wnt-3A) contains a Wnt3a expression construct under PGK promoter control with neomycin resistance, enabling secretion of Wnt3a. The insert is stably integrated into L-cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
פיברובלסט

04Identifiers

Citation
L Wnt-3A (מספר קטלוג Cytion 305184)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0635

05Expression and susceptibility

Protein expression
Wnt-3A

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 10% FBS, 0.4 מ"ג/מ"ל G-418
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Breed / subspecies
C3H/An
Donor age
100 ימים