.jpg)
- Tissue
- רקמת חיבור תת-עורית, רקמת שד ורקמת שומן
- Synonyms
- L-Wnt-3A, L-Wnt3A, LWnt3A, LWnt-3A
Documents
L Wnt-3A
Cell line · Product number 305184
The L Wnt-3A cell line is a derivative of the L cells, originally derived from mouse fibroblast cells. This cell line is specifically engineered to stably...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
קו התאים L Wnt-3A הוא נגזרת של תאי L, שמקורם בתאי פיברובלסט של עכברים. קו תאים זה תוכנן במיוחד כדי לבטא באופן יציב את החלבון Wnt-3A, מרכיב קריטי במסלול האיתות Wnt. איתות Wnt הוא חיוני לתהליכי התפתחות שונים, כולל התרבות תאים, התמיינות ונדידה. הביטוי היציב של Wnt-3A בקו תאים זה הופך אותו לכלי חשוב לחקר המנגנונים המולקולריים העומדים בבסיס תהליכים ביולוגיים אלה, במיוחד בהקשר של מחקר הסרטן, התחדשות רקמות והתפתחות עוברית.
חוקרים מרבים להשתמש בקו התאים L Wnt-3A לייצור מצע מותנה עשיר ב-Wnt-3A, אשר ניתן להשתמש בו להפעלת מסלול Wnt בסוגים אחרים של תאים. יישום זה מועיל במיוחד בחקר ביולוגיה של תאי גזע ורפואה רגנרטיבית, שבהם מסלול Wnt ממלא תפקיד מרכזי בשמירה על פלוריפוטנטיות של תאי גזע ובקידום תיקון רקמות. בנוסף, קו התאים משמש כמודל לחקר חוסר הסדירות באיתות Wnt בסוגים שונים של סרטן, ומספק תובנות לגבי מטרות טיפוליות וטיפולים פוטנציאליים.
בזכות הביטוי החזק והאמין של Wnt-3A, קו התאים L Wnt-3A נמצא בשימוש נרחב במעבדות לחקר ההשפעות של איתות Wnt על תהליכים תאיים שונים. זהו משאב חיוני עבור מדענים המבקשים לפענח את המורכבות של תפקודים תאיים המתווכים על ידי Wnt ולפתח אסטרטגיות חדשות לוויסות מסלול זה בהקשרים של מחלות.
- Tissue
- רקמת חיבור תת-עורית, רקמת שד ורקמת שומן
- Synonyms
- L-Wnt-3A
- L-Wnt3A
- LWnt3A
- LWnt-3A
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This murine L-cell-derived line (L Wnt-3A) contains a Wnt3a expression construct under PGK promoter control with neomycin resistance, enabling secretion of Wnt3a. The insert is stably integrated into L-cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- פיברובלסט
04Identifiers
- Citation
- L Wnt-3A (מספר קטלוג Cytion 305184)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_0635
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- Wnt-3A
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתמיסה 10% FBS, 0.4 מ"ג/מ"ל G-418
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Breed / subspecies
- C3H/An
- Donor age
- 100 ימים
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes