Přejít na obsah
L Wnt-3A
Tkáň
Podkožní pojivová tkáň, areolární a tuková tkáň
Synonyma
L-Wnt-3A, L-Wnt3A, LWnt3A, LWnt-3A

Dokumenty

L Wnt-3A

Cell line · Číslo výrobku 305184

The L Wnt-3A cell line is a derivative of the L cells, originally derived from mouse fibroblast cells. This cell line is specifically engineered to stably...

€430.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie L Wnt-3A je derivátem buněk L, původně odvozených z myších fibroblastů. Tato buněčná linie je speciálně upravena tak, aby stabilně exprimovala protein Wnt-3A, který je kritickou součástí signální dráhy Wnt. Signalizace Wnt je klíčová pro různé vývojové procesy, včetně buněčné proliferace, diferenciace a migrace. Stabilní exprese proteinu Wnt-3A v této buněčné linii z ní činí cenný nástroj pro studium molekulárních mechanismů, které jsou základem těchto biologických procesů, zejména v kontextu výzkumu rakoviny, regenerace tkání a embryonálního vývoje.

Výzkumníci často využívají buněčnou linii L Wnt-3A k produkci podmíněného média bohatého na Wnt-3A, které lze poté použít k aktivaci signalizace Wnt v jiných typech buněk. Toto použití je zvláště přínosné při studiu biologie kmenových buněk a regenerativní medicíny, kde signalizace Wnt hraje klíčovou roli při udržování pluripotence kmenových buněk a podpoře obnovy tkání. Kromě toho tato buněčná linie slouží jako model pro zkoumání dysregulace signalizace Wnt u různých druhů rakoviny, což poskytuje poznatky o potenciálních terapeutických cílech a léčbě.

Vzhledem k robustní a spolehlivé expresi Wnt-3A se buněčná linie L Wnt-3A v laboratořích hojně využívá ke zkoumání účinků signalizace Wnt na různé buněčné procesy. Je nepostradatelným zdrojem informací pro vědce, kteří se snaží odhalit složitost buněčných funkcí zprostředkovaných Wnt a vyvinout nové strategie pro modulaci této dráhy v kontextu onemocnění.

Tkáň
Podkožní pojivová tkáň, areolární a tuková tkáň
Synonyma
  • L-Wnt-3A
  • L-Wnt3A
  • LWnt3A
  • LWnt-3A

02Klasifikace

Organismus
Myš
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This murine L-cell-derived line (L Wnt-3A) contains a Wnt3a expression construct under PGK promoter control with neomycin resistance, enabling secretion of Wnt3a. The insert is stably integrated into L-cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Fibroblasty

04Identifikátory

Citace
L Wnt-3A (katalogové číslo Cytion 305184)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0635

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
Wnt-3A

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium 10% FBS, 0,4 mg/ml G-418
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Plemeno / poddruh
C3H/An
Věk dárce
100 dní