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L Wnt-3A
Pañuelo de papel
Tejido conjuntivo subcutáneo, areolar y adiposo
Sinónimos
L-Wnt-3A, L-Wnt3A, LWnt3A, LWnt-3A

Documentos

L Wnt-3A

Cell line · Número de producto 305184

The L Wnt-3A cell line is a derivative of the L cells, originally derived from mouse fibroblast cells. This cell line is specifically engineered to stably...

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01Información general

Descripción

La línea celular L Wnt-3A es un derivado de las células L, derivadas originalmente de células de fibroblastos de ratón. Esta línea celular está diseñada específicamente para expresar de forma estable la proteína Wnt-3A, un componente crítico de la vía de señalización Wnt. La señalización Wnt es crucial para diversos procesos de desarrollo, como la proliferación, la diferenciación y la migración celular. La expresión estable de Wnt-3A en esta línea celular la convierte en una valiosa herramienta para estudiar los mecanismos moleculares subyacentes a estos procesos biológicos, especialmente en el contexto de la investigación del cáncer, la regeneración de tejidos y el desarrollo embrionario.

Los investigadores utilizan a menudo la línea celular L Wnt-3A para producir medio condicionado rico en Wnt-3A, que puede utilizarse posteriormente para activar la señalización Wnt en otros tipos celulares. Esta aplicación es especialmente beneficiosa en el estudio de la biología de las células madre y la medicina regenerativa, donde la señalización Wnt desempeña un papel fundamental en el mantenimiento de la pluripotencia de las células madre y la promoción de la reparación de tejidos. Además, la línea celular sirve como modelo para investigar la desregulación de la señalización de Wnt en varios tipos de cáncer, lo que proporciona información sobre posibles dianas terapéuticas y tratamientos.

Debido a la expresión robusta y fiable de Wnt-3A, la línea celular L Wnt-3A se utiliza ampliamente en los laboratorios para explorar los efectos de la señalización Wnt en diferentes procesos celulares. Es un recurso indispensable para los científicos que pretenden desentrañar las complejidades de las funciones celulares mediadas por Wnt y desarrollar estrategias novedosas para modular esta vía en contextos patológicos.

Pañuelo de papel
Tejido conjuntivo subcutáneo, areolar y adiposo
Sinónimos
  • L-Wnt-3A
  • L-Wnt3A
  • LWnt3A
  • LWnt-3A

02Clasificación

Organismo
Ratón
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Situación respecto a los OMG
GMO-S1
Detalles sobre la presencia de OMG
GMO-S1: This murine L-cell-derived line (L Wnt-3A) contains a Wnt3a expression construct under PGK promoter control with neomycin resistance, enabling secretion of Wnt3a. The insert is stably integrated into L-cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Fibroblastos

04Identificadores

Referencia
L Wnt-3A (número de catálogo 305184 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0635

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de proteínas
Wnt-3A

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Suplementar el medio con 10% FBS, 0,4 mg/mL G-418
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Raza / subespecie
C3H/An
Edad del donante
100 días