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L Wnt-3A
ティッシュ
皮下結合組織、乳頭状組織、脂肪組織
同義語
L-Wnt-3A, L-Wnt3A, LWnt3A, LWnt-3A

L Wnt-3A

Cell line · 製品番号 305184

The L Wnt-3A cell line is a derivative of the L cells, originally derived from mouse fibroblast cells. This cell line is specifically engineered to stably...

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01概要

説明

L Wnt-3A細胞株は、もともとマウスの線維芽細胞に由来するL細胞の誘導体である。この細胞株は、Wntシグナル伝達経路の重要な構成要素であるWnt-3Aタンパク質を安定に発現するように特異的に操作されている。Wntシグナル伝達は、細胞増殖、分化、遊走を含む様々な発生過程に極めて重要である。この細胞株におけるWnt-3Aの安定な発現は、特に癌研究、組織再生、胚発生などの文脈において、これらの生物学的プロセスの根底にある分子メカニズムを研究するための貴重なツールとなる。

研究者はしばしばL Wnt-3A細胞株を利用して、Wnt-3Aを豊富に含む条件培地を生産し、それを用いて他の細胞型のWntシグナル伝達を活性化することができる。この応用は、幹細胞の多能性を維持し組織修復を促進する上でWntシグナル伝達が極めて重要な役割を果たしている幹細胞生物学と再生医学の研究において特に有益である。さらに、この細胞株は、様々な癌におけるWntシグナルの調節異常を調べるモデルとして機能し、潜在的な治療標的や治療法についての洞察を提供する。

Wnt-3Aの強固で信頼性の高い発現により、L Wnt-3A細胞株は様々な細胞プロセスに対するWntシグナルの影響を調べるために研究室で広く用いられている。Wnt-3A細胞株は、Wntが介在する細胞機能の複雑さを解明し、疾患と関連したこの経路を調節する新しい戦略を開発することを目指す科学者にとって、欠くことのできないリソースである。

ティッシュ
皮下結合組織、乳頭状組織、脂肪組織
同義語
  • L-Wnt-3A
  • L-Wnt3A
  • LWnt3A
  • LWnt-3A

02分類

生物
マウス
セックス
男性
成長特性
アドヘレント
GMOの有無
GMO-S1
GMOのステータスに関する詳細
GMO-S1: This murine L-cell-derived line (L Wnt-3A) contains a Wnt3a expression construct under PGK promoter control with neomycin resistance, enabling secretion of Wnt3a. The insert is stably integrated into L-cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
線維芽細胞

04識別子

引用
L Wnt-3A(Cytion カタログ番号 305184)
NCBI 納税者番号
10090
セロサウルス
CVCL_0635

05発現と感受性

タンパク質の発現
Wnt-3A

06取り扱いと飼育

培地
DMEM、w:4.5g/Lグルコース、w:4mM L-グルタミン、w:3.7g/L NaHCO3、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム(Cytion品番820300a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBS、0.4 mg/mL G-418を添加する。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
流体の更新
週2~3回
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

品種/亜種
C3H/An
ドナーの年齢
100日