Премини към съдържанието
L Wnt-3A
Тъкан
Подкожна съединителна тъкан, ареоларна и мастна
Синоними
L-Wnt-3A, L-Wnt3A, LWnt3A, LWnt-3A

Документи

L Wnt-3A

Cell line · Номер на продукта 305184

The L Wnt-3A cell line is a derivative of the L cells, originally derived from mouse fibroblast cells. This cell line is specifically engineered to stably...

€430.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия L Wnt-3A е производна на клетките L, първоначално получени от миши фибробластни клетки. Тази клетъчна линия е специално създадена, за да експресира стабилно протеина Wnt-3A, който е критичен компонент на сигналния път на Wnt. Wnt сигнализацията е от решаващо значение за различни процеси на развитие, включително клетъчна пролиферация, диференциация и миграция. Стабилната експресия на Wnt-3A в тази клетъчна линия я превръща в ценен инструмент за изучаване на молекулярните механизми, лежащи в основата на тези биологични процеси, особено в контекста на изследванията на рака, регенерацията на тъканите и ембрионалното развитие.

Изследователите често използват клетъчната линия L Wnt-3A, за да произвеждат кондиционирана среда, богата на Wnt-3A, която след това може да се използва за активиране на Wnt сигнализацията в други клетъчни типове. Това приложение е особено полезно при изучаването на биологията на стволовите клетки и регенеративната медицина, където Wnt сигнализацията играе ключова роля в поддържането на плурипотентността на стволовите клетки и подпомага възстановяването на тъканите. Освен това клетъчната линия служи като модел за изследване на дисрегулацията на Wnt сигнализацията при различни видове рак, което дава представа за потенциални терапевтични цели и лечения.

Благодарение на силната и надеждна експресия на Wnt-3A клетъчната линия L Wnt-3A се използва широко в лабораториите за изследване на ефектите на Wnt сигнализацията върху различни клетъчни процеси. Тя е незаменим ресурс за учените, които се стремят да разкрият сложността на Wnt-медиираните клетъчни функции и да разработят нови стратегии за модулиране на този път в контекста на заболяванията.

Тъкан
Подкожна съединителна тъкан, ареоларна и мастна
Синоними
  • L-Wnt-3A
  • L-Wnt3A
  • LWnt3A
  • LWnt-3A

02Класификация

Организъм
Мишка
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
GMO-S1
Подробности относно статуса на ГМО
GMO-S1: This murine L-cell-derived line (L Wnt-3A) contains a Wnt3a expression construct under PGK promoter control with neomycin resistance, enabling secretion of Wnt3a. The insert is stably integrated into L-cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Фибробласти

04Идентификатори

Източник
L Wnt-3A (каталожен номер на Cytion 305184)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10090
Целозавър
CVCL_0635

05Проява и предразположеност

Експресия на протеини
Wnt-3A

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS, 0,4 mg/mL G-418
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Порода / подвид
C3H/An
Възраст на донора
100 дни