L Wnt-3A

A linhagem celular L Wnt-3A é um derivado das células L, originalmente derivadas de fibroblastos de camundongo. Essa linhagem celular foi especificamente modificada para expressar de forma estável a proteína Wnt-3A, um componente essencial da via de sinalização Wnt. A sinalização Wnt é crucial para vários processos de desenvolvimento, incluindo proliferação, diferenciação e migração celular. A expressão estável de Wnt-3A nessa linha celular torna-a uma ferramenta valiosa para o estudo dos mecanismos moleculares subjacentes a esses processos biológicos, particularmente no contexto da pesquisa sobre câncer, regeneração de tecidos e desenvolvimento embrionário.

Os pesquisadores frequentemente utilizam a linhagem celular L Wnt-3A para produzir meio condicionado rico em Wnt-3A, que pode então ser usado para ativar a via de sinalização Wnt em outros tipos de células. Essa aplicação é especialmente benéfica no estudo da biologia das células-tronco e da medicina regenerativa, onde a sinalização Wnt desempenha um papel fundamental na manutenção da pluripotência das células-tronco e na promoção do reparo tecidual. Além disso, a linha celular serve como modelo para investigar a desregulação da sinalização Wnt em vários tipos de câncer, fornecendo insights sobre possíveis alvos terapêuticos e tratamentos.

Devido à expressão robusta e confiável do Wnt-3A, a linha celular L Wnt-3A é amplamente utilizada em laboratórios para explorar os efeitos da sinalização Wnt em diferentes processos celulares. É um recurso indispensável para cientistas que buscam desvendar as complexidades das funções celulares mediadas pelo Wnt e desenvolver novas estratégias para modular essa via no contexto de doenças.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.