LMH

Les cellules LMH, dérivées d'un hépatome mâle Leghorn, sont une lignée cellulaire polyvalente largement utilisée dans la recherche biologique. Tomoyuki Kitagawa les a créées en 1981 à l'Institut du cancer de Tokyo, au Japon. Ces cellules ont un phénotype épithélial et sont particulièrement utiles pour étudier les interactions hôte-pathogène dans le tractus gastro-intestinal de la volaille.

Les cellules LMH sont adhérentes et présentent une morphologie de type dendritique. Elles expriment la glucose-6-phosphatase et une faible activité ATPase canaliculaire. Avec un caryotype triploïde et six chromosomes marqueurs, ces cellules présentent des caractéristiques génétiques distinctes.
Il a notamment été démontré que les cellules LMH supportent efficacement la synthèse de l'ADN du virus de l'hépatite B duck (DHBV) lorsqu'elles sont transfectées avec des constructions virales. Cela en fait un outil précieux pour la recherche en virologie, en particulier dans le contexte des infections virales liées à la volaille.
Pour obtenir des cellules LMH, il a fallu induire des nodules tumoraux dans le foie de poulets Leghorn par un traitement à long terme à la diéthylnitrosamine. Ces cellules ont également été transformées chimiquement, ce qui a permis leur immortalisation et leur propagation continue en culture.

En termes de tumorigénicité, les cellules LMH ont la capacité de former des tumeurs chez des souris nude athymiques. Cette caractéristique en fait un modèle important pour l'étude du carcinome hépatocellulaire. Les cellules LMH expriment le récepteur des œstrogènes et peuvent être amenées à exprimer le gène de l'apolipoprotéine II (apoII) spécifique du foie. Cela indique leur implication dans les voies de signalisation des œstrogènes et dans le métabolisme des lipides. Pour cultiver les cellules LMH, il est nécessaire de pré-enrober les récipients de culture tissulaire avec du collagène. Cela permet d'assurer une bonne adhésion et une bonne croissance des cellules.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie