LMH

Les cellules LMH, dérivées d’un hépatome masculin de Leghorn, constituent une lignée cellulaire polyvalente largement utilisée dans la recherche biologique. Elles ont été mises au point par Tomoyuki Kitagawa en 1981 à l’Institut du cancer de Tokyo, au Japon. Ces cellules présentent un phénotype épithélial et sont particulièrement utiles pour l’étude des interactions hôte-pathogène dans le tractus gastro-intestinal de la volaille.

Les cellules LMH sont adhérentes et présentent une morphologie de type dendritique. Elles expriment la glucose-6-phosphatase et une faible activité d’ATPase canaliculaire. Dotées d’un caryotype triploïde et de six chromosomes marqueurs, ces cellules présentent des caractéristiques génétiques distinctes.
Il est notamment démontré que les cellules LMH favorisent efficacement la synthèse de l’ADN du virus de l’hépatite B du canard (DHBV) lorsqu’elles sont transfectées avec des constructions virales. Cela en fait un outil inestimable pour la recherche en virologie, en particulier dans le contexte des infections virales liées à la volaille.
L’obtention des cellules LMH a nécessité l’induction de nodules tumoraux dans le foie de poulets de race Leghorn par un traitement à long terme à la diéthylnitrosamine. Ces cellules ont également subi une transformation chimique, ce qui a permis leur immortalisation et leur propagation continue en culture.

En termes de tumorigénicité, les cellules LMH ont la capacité de former des tumeurs chez les souris nues athymiques. Cette caractéristique en fait un modèle important pour l’étude du carcinome hépatocellulaire. Les cellules LMH expriment le récepteur des œstrogènes et peuvent être amenées à exprimer le gène de l’apolipoprotéine II (apoII), spécifique au foie. Cela indique leur implication dans les voies de signalisation des œstrogènes et le métabolisme des lipides. Pour cultiver les cellules LMH, il est nécessaire de pré-enduire les récipients de culture tissulaire de collagène. Cela assure une adhérence et une croissance cellulaires adéquates.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.