
- Tkanivo
- Pečeň
- Choroba
- Hepatocelulárny karcinóm
- Synonymá
- Leghorn Male Hepatoma cell line
Dokumenty
LMH
Cell line · Číslo výrobku 601411
LMH cells, derived from a Leghorn male hepatoma, are a versatile cell line widely used in biological research. Tomoyuki Kitagawa established them in 1981 ...
Prispôsobenie / Odporúčania
- LMHCell line€550.00
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
01Všeobecné informácie
- Popis
Bunky LMH, odvodené od samčieho hepatómu Leghorn, sú univerzálnou bunkovou líniou, ktorá sa široko používa v biologickom výskume. Tomoyuki Kitagawa ich založil v roku 1981 na Inštitúte pre rakovinu v Tokiu v Japonsku. Tieto bunky majú epitelový fenotyp a sú obzvlášť užitočné na štúdium interakcií medzi hostiteľom a patogénom v gastrointestinálnom trakte hydiny.
Bunky LMH sú adherentné a vykazujú morfológiu podobnú dendritom. Vyjadrujú glukózo-6-fosfatázu a slabú aktivitu kanálovej ATPázy. Tieto bunky s triploidným karyotypom a šiestimi markerovými chromozómami vykazujú odlišné genetické charakteristiky.
Ukázalo sa, že bunky LMH účinne podporujú syntézu DNA vírusu kačacej hepatitídy B (DHBV) pri transfekcii vírusovými konštruktmi. To z nich robí neoceniteľný nástroj pre virologický výskum, najmä v súvislosti s vírusovými infekciami hydiny.
Odvodenie buniek LMH zahŕňalo indukciu nádorových uzlíkov v pečeni kurčiat plemena Leghorn prostredníctvom dlhodobého ošetrenia dietylnitrozamínom. Tieto bunky boli tiež chemicky transformované, čo umožnilo ich imortalizáciu a kontinuálne rozmnožovanie v kultúre.Pokiaľ ide o nádorovú aktivitu, bunky LMH majú schopnosť vytvárať nádory v atýmových nahých myšiach. Táto vlastnosť z nich robí dôležitý model na štúdium hepatocelulárneho karcinómu. Bunky LMH exprimujú estrogénový receptor a môžu byť indukované na expresiu pečeňovo špecifického génu apolipoproteínu II (apoII). To naznačuje ich zapojenie do estrogénových signálnych dráh a metabolizmu lipidov. Na kultiváciu buniek LMH je potrebné vopred pokryť nádoby na kultiváciu tkanív kolagénom. Tým sa zabezpečí správna adhézia a rast buniek.
- Tkanivo
- Pečeň
- Choroba
- Hepatocelulárny karcinóm
- Aplikácie
- Bunková línia je užitočná na štúdie transfekcie.
- Synonymá
- Leghorn Male Hepatoma cell line
02Klasifikácia
- Organizmus
- Kuracie mäso
- Sex
- Muž
- Rastové vlastnosti
- Prívrženec
- Úroveň biologickej bezpečnosti
- 1
03Charakteristiky
- Morfológia
- Epitelové, dendritické.
- Tumorigenický
- Bunky LMH tvoria nádory u atýmových myší.
- Karyotyp
- Triploid, modálne číslo = 116, šesť markerových chromozómov
04Identifikátory
- Citácia
- LMH (katalógové číslo Cytion 601411)
- Daňové identifikačné číslo NCBI
- 9031
- Cellosaurus
- CVCL_2580
05Prejav a náchylnosť
- Exprimované receptory
- Estrogén (nízka expresia).
- Produkty
- Glukóza-6-fosfatáza, kanálová ATPázová aktivita (slabá)
06Manipulácia a kultivácia
- Kultivačné médium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamín, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion číslo článku 820100a)
- Inkubačná atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplnky stravy
- Doplňte médium o 10% FBS a 1% NEAA
- Disociačné činidlo
- Accutase
- Rozmnožovanie kultúr
- Bunky LMH sa lepšie prichytávajú na cievy tkanivových kultúr, ktoré boli vopred potiahnuté kolagénom. Odstráňte médium a opláchnite prichytené bunky pomocou PBS bez vápnika a horčíka (3 - 5 ml PBS pre banky na kultiváciu buniek T25, 5 - 10 ml pre banky na kultiváciu buniek T75). Pridajte Accutase (1 - 2 ml na T25, 2,5 ml na banku s bunkovou kultúrou T75), bunkový list musí byť úplne pokrytý. Inkubujte pri teplote okolia 8-10 minút. Opatrne resuspendujte bunky s médiom (10 ml), odstreďujte 3 minúty pri 300 g, resuspendujte bunky v čerstvom médiu a rozmiestnite do nových fliaš, ktoré obsahujú čerstvé médium
- Hustota výsevu
- 1 až 3 x 104 buniek/cm2
- Obnova kvapaliny
- Každé 2 dni
- Rozmrazovanie a kultivácia
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kvality a kryokonzervácia
- Sterilita
Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.
Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.
- Mrazové médium
- Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
- Podmienky skladovania
Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.
- Dopravné podmienky
Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.
08Darca
- Plemeno / poddruh
- Leghorn
- Vek darcu
- 16 mesiacov
09Právne informácie a bezpečnosť
- Bezpečnostné opatrenia
- Pri plánovaní uskladnenia kryovírusu v kvapalnom dusíku na budúce rozmrazenie je potrebné dodržiavať prísne bezpečnostné opatrenia. Vhodné ochranné rukavice a odev sú nevyhnutné a počas prenosu zmrazených vzoriek do nádrže s tekutým dusíkom alebo z nej sa vyžaduje používanie tvárovej masky alebo ochranných okuliarov. Je to z dôvodu zníženia rizika poranenia v dôsledku možnej explózie kryovírusu pri vyberaní, ktorá môže mať za následok vymrštenie ostrých úlomkov.
- Upozornenie
- Naše bunky sa poskytujú výlučne na účely laboratórneho výskumu in vitro a nie sú určené na klinické alebo diagnostické použitie, ani sa nemajú podávať ľuďom alebo používať na veterinárne účely. Používatelia musia dodržiavať všetky platné smernice a predpisy pre manipuláciu a používanie týchto buniek vo výskumnom prostredí.
- Záruka
V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste
Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke
- Je potrebná dohoda o prenose materiálu
- Áno