Skip to content
LMH
Tissue
ตับ
Disease
มะเร็งตับชนิดเซลล์ตับ
Synonyms
Leghorn Male Hepatoma cell line

Documents

LMH

Cell line · Product number 601411

LMH cells, derived from a Leghorn male hepatoma, are a versatile cell line widely used in biological research. Tomoyuki Kitagawa established them in 1981 ...

€550.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ LMH ซึ่งได้มาจากตับมะเร็งของไก่พันธุ์เลกฮอร์นเพศผู้ เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่มีความหลากหลายและถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในงานวิจัยทางชีววิทยา ทโมยูกิ คิตากาวะ ได้ก่อตั้งเซลล์เหล่านี้ขึ้นในปี พ.ศ. 2524 ที่สถาบันมะเร็งในกรุงโตเกียว ประเทศญี่ปุ่น เซลล์เหล่านี้มีลักษณะทางสัณฐานวิทยาเป็นเซลล์เยื่อบุผิว และมีประโยชน์อย่างยิ่งในการศึกษาปฏิสัมพันธ์ระหว่างโฮสต์กับเชื้อโรคในระบบทางเดินอาหารของสัตว์ปีก

เซลล์ LMH เป็นเซลล์ที่เกาะติดและมีลักษณะคล้ายเดนไดรต์ พวกมันแสดงออกของเอนไซม์กลูโคส-6-ฟอสฟาเตสและกิจกรรม ATPase ในช่องท่ออ่อนแอ ด้วยโครโมโซมแบบไตรโซมีและโครโมโซมเครื่องหมายหกตัว เซลล์เหล่านี้แสดงลักษณะทางพันธุกรรมที่โดดเด่น
ที่น่าสังเกตคือ เซลล์ LMH ได้แสดงให้เห็นว่าสามารถสนับสนุนการสังเคราะห์ดีเอ็นเอของไวรัสตับอักเสบชนิดบีในเป็ด (DHBV) ได้อย่างมีประสิทธิภาพเมื่อถูกถ่ายโอนด้วยโครงสร้างไวรัส ซึ่งทำให้เซลล์เหล่านี้เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าอย่างยิ่งสำหรับการวิจัยด้านไวรัสวิทยา โดยเฉพาะในบริบทของการติดเชื้อไวรัสที่เกี่ยวข้องกับสัตว์ปีก
การได้มาซึ่งเซลล์ LMH เกิดจากการเหนี่ยวนำให้เกิดก้อนเนื้องอกในตับของไก่พันธุ์เลกฮอร์น โดยการให้สารไดเอทิลไนโตรซามีนเป็นระยะเวลานาน เซลล์เหล่านี้ยังได้รับการเปลี่ยนแปลงทางเคมี ทำให้สามารถคงสภาพความเป็นอมตะและขยายพันธุ์อย่างต่อเนื่องในวัฒนธรรมเซลล์

ในแง่ของความสามารถในการก่อเนื้องอก เซลล์ LMH มีความสามารถในการก่อตัวเป็นเนื้องอกในหนูที่ไม่มีต่อมไทมัส (athymic nude mice) ลักษณะนี้ทำให้เซลล์ LMH เป็นแบบจำลองที่สำคัญสำหรับการศึกษาโรคมะเร็งตับชนิดเซลล์ตับ (hepatocellular carcinoma)เซลล์ LMH แสดงตัวรับเอสโตรเจนและสามารถถูกกระตุ้นให้แสดงยีนอะโพไลโปโปรตีน II (apoII) เฉพาะในตับได้ ซึ่งบ่งชี้ว่าเซลล์เหล่านี้มีส่วนร่วมในวิถีการส่งสัญญาณเอสโตรเจนและการเผาผลาญไขมัน ในการเพาะเลี้ยงเซลล์ LMH จำเป็นต้องเคลือบภาชนะเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อด้วยคอลลาเจนก่อนล่วงหน้า เพื่อให้แน่ใจว่าเซลล์ยึดเกาะและเจริญเติบโตได้อย่างเหมาะสม

Tissue
ตับ
Disease
มะเร็งตับชนิดเซลล์ตับ
Applications
สายพันธุ์เซลล์นี้มีประโยชน์สำหรับการศึกษาการถ่ายโอนยีน
Synonyms
  • Leghorn Male Hepatoma cell line

02Classification

Organism
Chicken
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
คล้ายเซลล์เยื่อบุผิว, คล้ายเซลล์เดนไดรต์
Tumourigenic
เซลล์ LMH ก่อให้เกิดเนื้องอกในหนูที่ไม่มีไทมัส
Karyotype
ไตรพลอยด์, จำนวนโมดอล = 116, โครโมโซมที่มีเครื่องหมาย 6 ตัว

04Identifiers

Citation
LMH (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 601411)
NCBI TaxID
9031
Cellosaurus
CVCL_2580

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
เอสโตรเจน (การแสดงออกในระดับต่ำ)
Products
กลูโคส-6-ฟอสเฟตเทส, กิจกรรม ATPase ในท่อ (อ่อน)

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ NEAA 1%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
เซลล์ LMH จะยึดเกาะกับภาชนะเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อได้ดีขึ้นเมื่อมีการเคลือบด้วยคอลลาเจนล่วงหน้า นำอาหารเลี้ยงเซลล์ออกและล้างเซลล์ที่เกาะติดอยู่ด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม (3-5 มล. สำหรับขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ขนาด T25, 5-10 มล. สำหรับขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ขนาด T75) เติม Accutase (1-2 มล. ต่อขวด T25, 2.5 มล. ต่อขวด T75) ให้ครอบคลุมแผ่นเซลล์ทั้งหมดบ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาที ระวังในการแขวนเซลล์ให้เข้ากันใหม่ด้วยอาหารเลี้ยงเชื้อ (10 มล.) ปั่นเหวี่ยงที่ 300 g เป็นเวลา 3 นาที แขวนเซลล์ให้เข้ากันใหม่ในอาหารเลี้ยงเชื้อสด และแบ่งใส่ลงในขวดเพาะเชื้อใหม่ที่มีอาหารเลี้ยงเชื้อสด
Seeding density
1 ถึง 3 x 104 เซลล์/เซนติเมตร²
Fluid renewal
ทุก 2 วัน
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
เลกฮอร์น
Donor age
16 เดือน