Gå til innholdet
LMH
Vev
Lever
Sykdom
Hepatocellulært karsinom
Synonymer
Leghorn Male Hepatoma cell line

Dokumenter

LMH

Cell line · Produktnummer 601411

LMH cells, derived from a Leghorn male hepatoma, are a versatile cell line widely used in biological research. Tomoyuki Kitagawa established them in 1981 ...

€550.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

LMH-celler, som stammer fra et hepatom fra Leghorn-hannen, er en allsidig cellelinje som er mye brukt i biologisk forskning. Tomoyuki Kitagawa etablerte dem i 1981 ved Cancer Institute i Tokyo, Japan. Disse cellene har en epitelial fenotype og er spesielt nyttige for å studere interaksjoner mellom vert og patogen i mage-tarmkanalen hos fjørfe.

LMH-celler er adherente og har en dendrittisk-lignende morfologi. De uttrykker glukose-6-fosfatase og svak ATPase-aktivitet i kanalene. Med en triploid karyotype og seks markørkromosomer har disse cellene distinkte genetiske egenskaper.
LMH-celler har vist seg å effektivt støtte DNA-syntese av andehepatitt B-virus (DHBV) når de transfekteres med viruskonstruksjoner. Dette gjør dem til et uvurderlig verktøy for virologisk forskning, særlig i forbindelse med fjørferelaterte virusinfeksjoner.
LMH-cellene ble fremstilt ved å indusere svulstknuter i leveren hos leghornkyllinger gjennom langtidsbehandling med dietylnitrosamin. Disse cellene har også blitt kjemisk transformert, noe som har gjort det mulig å udødeliggjøre dem og oppformere dem kontinuerlig i kultur.

Når det gjelder tumorigenisitet, har LMH-celler evnen til å danne svulster i athymiske nakenmus. Denne egenskapen gjør dem til en viktig modell for studier av hepatocellulært karsinom. LMH-celler uttrykker østrogenreseptoren og kan induseres til å uttrykke det leverspesifikke apolipoprotein II (apoII)-genet. Dette indikerer at de er involvert i østrogensignalveier og lipidmetabolisme. For å dyrke LMH-celler er det nødvendig å precoate vevskulturkar med kollagen. Dette sikrer riktig celleadhesjon og vekst.

Vev
Lever
Sykdom
Hepatocellulært karsinom
Søknader
Cellelinjen er nyttig for transfeksjonsstudier.
Synonymer
  • Leghorn Male Hepatoma cell line

02Klassifisering

Organisme
Kylling
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende, Dendritisk-lignende.
Tumorinduserende
LMH-celler danner svulster i athymiske mus.
Karyotype
Triploid, modalt antall = 116, seks markørkromosomer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
LMH (Cytion-katalognummer 601411)
NCBI-skattenummer
9031
Cellosaurus
CVCL_2580

05Uttrykk og mottakelighet

Reseptorer som uttrykkes
Østrogen (lavt nivå av uttrykk).
Produkter
Glukose-6-fosfatase, kanalikulær ATPase-aktivitet (svak)

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), m: 2 mM L-Glutamin, m: 2,2 g/L NaHCO3, m: EBSS (Cytion artikkelnummer 820100a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS og 1 % NEAA
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
LMH-celler fester seg bedre til vevskulturbeholdere som er forhåndsbelagt med kollagen. Fjern mediet og skyll de adherente cellene med PBS uten kalsium og magnesium (3-5 ml PBS for T25, 5-10 ml for T75-celledyrkningsflasker). Tilsett Accutase (1-2 ml per T25, 2,5 ml per T75-cellekulturkolbe), cellearket må være helt dekket. Inkuber ved omgivelsestemperatur i 8-10 minutter. Resuspender cellene forsiktig med medium (10 ml), sentrifuger i 3 minutter ved 300 g, resuspender cellene i friskt medium og fordel dem i nye kolber som inneholder friskt medium
Såtetthet
1 til 3 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
Annenhver dag
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Rase / underart
Leghorn
Donorens alder
16 måneder