LMH

Las células LMH, derivadas de un hepatoma de un macho de la raza Leghorn, son una línea celular versátil ampliamente utilizada en la investigación biológica. Tomoyuki Kitagawa las estableció en 1981 en el Instituto del Cáncer de Tokio, Japón. Estas células tienen un fenotipo epitelial y son particularmente útiles para estudiar las interacciones entre el huésped y el patógeno en el tracto gastrointestinal de las aves de corral.

Las células LMH son adherentes y presentan una morfología de tipo dendrítico. Expresan glucosa-6-fosfatasa y una actividad débil de ATPasa canalicular. Con un cariotipo triploide y seis cromosomas marcadores, estas células muestran características genéticas distintivas.
Cabe destacar que se ha demostrado que las células LMH favorecen de manera eficiente la síntesis de ADN del virus de la hepatitis B del pato (DHBV) cuando se transfectan con constructos virales. Esto las convierte en una herramienta invaluable para la investigación virológica, particularmente en el contexto de las infecciones virales relacionadas con las aves de corral.
La obtención de las células LMH implicó la inducción de nódulos tumorales en el hígado de gallinas Leghorn mediante un tratamiento a largo plazo con dietilnitrosamina. Estas células también han sido transformadas químicamente, lo que permite su inmortalización y propagación continua en cultivo.

En cuanto a la tumorigenicidad, las células LMH tienen la capacidad de formar tumores en ratones desnudos atímicos. Esta característica las convierte en un modelo importante para el estudio del carcinoma hepatocelular. Las células LMH expresan el receptor de estrógeno y se les puede inducir a expresar el gen de la apolipoproteína II (apoII), específico del hígado. Esto indica su participación en las vías de señalización del estrógeno y en el metabolismo lipídico. Para cultivar células LMH, es necesario recubrir previamente los recipientes de cultivo de tejidos con colágeno. Esto garantiza la adhesión y el crecimiento adecuados de las células.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.