Tartalomra ugrás
LMH
Szövet
Máj
Betegség
Hepatocelluláris karcinóma
Szinonimák
Leghorn Male Hepatoma cell line

Dokumentumok

LMH

Cell line · Termékszám 601411

LMH cells, derived from a Leghorn male hepatoma, are a versatile cell line widely used in biological research. Tomoyuki Kitagawa established them in 1981 ...

€550.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A Leghorn hím hepatomából származó LMH sejtek a biológiai kutatásokban széles körben használt, sokoldalú sejtvonal. Tomoyuki Kitagawa 1981-ben hozta létre őket a tokiói Rákkutató Intézetben, Japánban. Ezek a sejtek epiteliális fenotípussal rendelkeznek, és különösen hasznosak a baromfi gyomor-bélrendszerében a gazdatest-patogén kölcsönhatások tanulmányozására.

Az LMH sejtek tapadnak és dendritikus morfológiát mutatnak. Glükóz-6-foszfatázt és gyenge csatorna-ATPáz aktivitást fejeznek ki. Triploid kariotípussal és hat marker kromoszómával ezek a sejtek külön genetikai jellemzőket mutatnak.
Kimutatták, hogy az LMH sejtek hatékonyan támogatják a kacsahepatitis B-vírus (DHBV) DNS-szintézisét, amikor víruskonstrukciókkal transzfektálják őket. Ez felbecsülhetetlen értékű eszközzé teszi őket a virológiai kutatásokban, különösen a baromfival kapcsolatos vírusfertőzésekkel összefüggésben.
Az LMH sejtek előállításához a leghorn csirkék májában dietilnitrózaminnal való hosszú távú kezeléssel tumoros csomókat kellett előidézni. Ezeket a sejteket kémiailag is átalakították, ami lehetővé tette immortalizálásukat és folyamatos szaporításukat a kultúrában.

A tumorigenitás tekintetében az LMH sejtek képesek tumorokat képezni athymikus meztelen egerekben. Ez a tulajdonságuk fontos modellé teszi őket a hepatocelluláris karcinóma tanulmányozására. Az LMH sejtek expresszálják az ösztrogénreceptort, és indukálhatók a májspecifikus apolipoprotein II (apoII) gén kifejezésére. Ez arra utal, hogy részt vesznek az ösztrogén jelátviteli útvonalakban és a lipidanyagcserében. Az LMH sejtek tenyésztéséhez a szövettenyésztő edényeket kollagénnel kell előzetesen bevonni. Ez biztosítja a sejtek megfelelő tapadását és növekedését.

Szövet
Máj
Betegség
Hepatocelluláris karcinóma
Alkalmazások
A sejtvonal hasznos transzfekciós vizsgálatokhoz.
Szinonimák
  • Leghorn Male Hepatoma cell line

02Osztályozás

Organizmus
Csirke
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű, dendritszerű.
Daganatképző
Az LMH sejtek athymikus egerekben tumorokat képeznek.
Kariotípus
Triploid, modális szám = 116, hat marker kromoszóma

04Azonosítók

Hivatkozás
LMH (Cytion katalógusszám 601411)
NCBI adóazonosító szám
9031
Cellosaurus
CVCL_2580

05Kifejeződés és fogékonyság

Kifejeződő receptorok
Ösztrogén (alacsony szintű expresszió).
Termékek
Glükóz-6-foszfatáz, csatorna-ATPáz aktivitás (gyenge)

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion cikkszám: 820100a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 10% FBS-szel és 1% NEAA-val kell kiegészíteni
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Az LMH sejtek jobban kötődnek a kollagénnel előzetesen bevont szövettenyésztési edényekhez. Távolítsa el a tápfolyadékot, és öblítse le a megtapadt sejteket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel (3-5 ml PBS T25, 5-10 ml T75 sejttenyésztő lombikok esetében). Adjunk hozzá Accutase-t (1-2 ml T25-ös, 2,5 ml T75-ös sejttenyésztő lombikban), a sejtlapot teljesen be kell fedni. Inkubáljuk szobahőmérsékleten 8-10 percig. Óvatosan reszuszpendáljuk a sejteket tápfolyadékkal (10 ml), centrifugáljuk 3 percig 300 g-nél, reszuszpendáljuk a sejteket friss tápfolyadékban, és adagoljuk új lombikokba, amelyek friss tápfolyadékot tartalmaznak
Ültetési sűrűség
1–3 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
2 naponta
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Faj / alfaj
Leghorn
Az adományozó életkora
16 hónap