Pereiti prie turinio
LMH
Audinys
Kepenys
Liga
Hepatocelulinė karcinoma
Sinonimai
Leghorn Male Hepatoma cell line

Dokumentai

LMH

Cell line · Prekės numeris 601411

LMH cells, derived from a Leghorn male hepatoma, are a versatile cell line widely used in biological research. Tomoyuki Kitagawa established them in 1981 ...

€550.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

LMH ląstelės, gautos iš Leghorn patinų hepatomos, yra universali ląstelių linija, plačiai naudojama biologiniuose tyrimuose. Tomoyuki Kitagawa jas sukūrė 1981 m. Vėžio institute Tokijuje (Japonija). Šios ląstelės turi epitelio fenotipą ir yra ypač naudingos tiriant šeimininko ir patogeno sąveiką naminių paukščių virškinimo trakte.

LMH ląstelės yra adherentiškos ir pasižymi dendrito tipo morfologija. Jos išreiškia gliukozės-6-fosfatazę ir silpną kanalinės ATPazės aktyvumą. Šios ląstelės turi triploidinį kariotipą ir šešias žymėtąsias chromosomas, todėl joms būdingos išskirtinės genetinės savybės.
Įrodyta, kad LMH ląstelės veiksmingai palaiko ančių hepatito B viruso (DHBV) DNR sintezę, kai jos transfekuojamos virusiniais konstruktais. Dėl to šios ląstelės yra neįkainojama priemonė virusologiniams tyrimams, ypač susijusiems su naminių paukščių virusinėmis infekcijomis.
LMH ląstelės buvo išgautos, kai ilgalaikis gydymas dietilnitrozaminu Leghorn vištų kepenyse sukėlė vėžinius mazgelius. Šios ląstelės taip pat buvo chemiškai transformuotos, kad būtų galima jas nemoralizuoti ir nuolat dauginti kultūroje.

LMH ląstelės pasižymi gebėjimu formuoti navikus athiminėse nude pelėse. Dėl šios savybės jos yra svarbus modelis hepatocelulinei karcinomai tirti. LMH ląstelės išreiškia estrogenų receptorius ir gali būti skatinamos išreikšti kepenims būdingą apolipoproteino II (apoII) geną. Tai rodo, kad jos dalyvauja estrogenų signaliniuose keliuose ir lipidų apykaitoje. Norint kultivuoti LMH ląsteles, būtina iš anksto padengti audinių kultūrų indus kolagenu. Tai užtikrina tinkamą ląstelių sukibimą ir augimą.

Audinys
Kepenys
Liga
Hepatocelulinė karcinoma
Paraiškos
Ši ląstelių linija naudinga transfekcijos tyrimams.
Sinonimai
  • Leghorn Male Hepatoma cell line

02Klasifikacija

Organizmas
Vištiena
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Panašus į epitelinį, panašus į dendritinį.
Tumorogeninis
LMH ląstelės formuoja navikus athiminėse pelėse.
Kariotipas
Triploidas, modalinis skaičius = 116, šešios žyminčios chromosomos

04Identifikatoriai

Nuoroda
LMH (Cytion katalogo numeris 601411)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9031
Cellosaurus
CVCL_2580

05Išraiška ir jautrumas

Išreikšti receptoriai
Estrogenas (maža raiška).
Produktai
Gliukozės-6-fosfatazė, kanalinės ATPazės aktyvumas (silpnas)

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
LMH ląstelės geriau prisitvirtina prie kolagenu iš anksto padengtų audinių kultūrų indų. Pašalinkite terpę ir nuplaukite prilipusias ląsteles, naudodami PBS be kalcio ir magnio (3-5 ml PBS T25, 5-10 ml T75 ląstelių kultūrų kolbose). Įpilkite "Accutase" (1-2 ml į T25, 2,5 ml į T75 ląstelių kultūrų kolbą), ląstelių lakštas turi būti visiškai padengtas. Inkubuokite aplinkos temperatūroje 8-10 minučių. Atsargiai permaišykite ląsteles su terpe (10 ml), 3 min. centrifuguokite 300 g greičiu, permaišykite ląsteles šviežioje terpėje ir išpilstykite į naujas kolbas, kuriose yra šviežia terpė
Sėjos tankis
1–3 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
Kas 2 dienas
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Veislė / porūšis
Leghorn
Donoro amžius
16 mėnesių