LMH

LMH-Zellen, die von einem männlichen Leghorn-Hepatom stammen, sind eine vielseitige Zelllinie, die in der biologischen Forschung weit verbreitet ist. Tomoyuki Kitagawa stellte sie 1981 am Krebsinstitut in Tokio, Japan, her. Diese Zellen haben einen epithelialen Phänotyp und sind besonders nützlich für die Untersuchung von Wirt-Pathogen-Interaktionen im Gastrointestinaltrakt von Geflügel.

LMH-Zellen sind adhärent und weisen eine dendritenähnliche Morphologie auf. Sie exprimieren Glucose-6-Phosphatase und eine schwache kanalikuläre ATPase-Aktivität. Mit einem triploiden Karyotyp und sechs Markerchromosomen weisen diese Zellen deutliche genetische Merkmale auf.
Insbesondere wurde gezeigt, dass LMH-Zellen die DNA-Synthese des Enten-Hepatitis-B-Virus (DHBV) effizient unterstützen, wenn sie mit viralen Konstrukten transfiziert werden. Dies macht sie zu einem unschätzbaren Werkzeug für die virologische Forschung, insbesondere im Zusammenhang mit Virusinfektionen bei Geflügel.
Zur Gewinnung von LMH-Zellen wurden in der Leber von Leghorn-Hühnern durch Langzeitbehandlung mit Diethylnitrosamin tumoröse Knötchen erzeugt. Diese Zellen wurden auch chemisch transformiert, was ihre Immortalisierung und kontinuierliche Vermehrung in Kultur ermöglichte.

Was die Tumorigenität angeht, so sind LMH-Zellen in der Lage, in athymischen Nacktmäusen Tumore zu bilden. Diese Eigenschaft macht sie zu einem wichtigen Modell für die Untersuchung des hepatozellulären Karzinoms. LMH-Zellen exprimieren den Östrogenrezeptor und können zur Expression des leberspezifischen Apolipoprotein II (apoII)-Gens veranlasst werden. Dies deutet darauf hin, dass sie an den Östrogen-Signalwegen und dem Fettstoffwechsel beteiligt sind. Um LMH-Zellen zu kultivieren, müssen Gewebekulturgefäße mit Kollagen vorbeschichtet werden. Dies gewährleistet die richtige Zelladhäsion und das Wachstum.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung