Перейти до вмісту
LMH
Тканина
Печінка
Хвороба
Гепатоцелюлярна карцинома
Синоніми
Leghorn Male Hepatoma cell line

Документи

LMH

Cell line · Номер товару 601411

LMH cells, derived from a Leghorn male hepatoma, are a versatile cell line widely used in biological research. Tomoyuki Kitagawa established them in 1981 ...

€550.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітини LMH, отримані з чоловічої гепатоми Легорна, є універсальною клітинною лінією, яка широко використовується в біологічних дослідженнях. Томоюкі Кітагава створив їх у 1981 році в Інституті раку в Токіо, Японія. Ці клітини мають епітеліальний фенотип і особливо корисні для вивчення взаємодії хазяїн-патоген у шлунково-кишковому тракті птиці.

Клітини LMH є адгезивними і мають дендритоподібну морфологію. Вони експресують глюкозо-6-фосфатазу і слабку активність каналікулярної АТФ-ази. Маючи триплоїдний каріотип і шість маркерних хромосом, ці клітини мають чіткі генетичні характеристики.
Зокрема, було показано, що клітини LMH ефективно підтримують синтез ДНК вірусу качиного гепатиту В (DHBV) при трансфекції вірусними конструкціями. Це робить їх безцінним інструментом для вірусологічних досліджень, особливо в контексті вірусних інфекцій, пов'язаних з домашньою птицею.
Отримання клітин LMH було пов'язано з індукцією пухлинних вузлів у печінці курей породи Леггорн за допомогою тривалого лікування діетилнітрозаміном. Ці клітини також були хімічно трансформовані, що дозволило їх увічнити і безперервно розмножувати в культурі.

З точки зору туморогенності, клітини ЛМГ мають здатність утворювати пухлини у атимічних голих мишей. Ця характеристика робить їх важливою моделлю для вивчення гепатоцелюлярної карциноми. Клітини LMH експресують рецептор естрогену і можуть бути індуковані до експресії гена печінково-специфічного аполіпопротеїну II (apoII). Це вказує на їхню участь в естрогенних сигнальних шляхах і метаболізмі ліпідів. Для культивування клітин ЛМГ необхідно попередньо покрити судини для вирощування тканин колагеном. Це забезпечує належну адгезію та ріст клітин.

Тканина
Печінка
Хвороба
Гепатоцелюлярна карцинома
Застосування
Клітинна лінія корисна для дослідження трансфекції.
Синоніми
  • Leghorn Male Hepatoma cell line

02Класифікація

Організм
Курка
Секс
Чоловік
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальні, дендритні.
Пухлиноутворювальний
Клітини ЛМГ утворюють пухлини в атимічних мишей.
Каріотип
Триплоїдний, модальне число = 116, шість маркерних хромосом

04Ідентифікатори

Посилання
LMH (номер за каталогом Cytion 601411)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9031
Целозавр
CVCL_2580

05Експресія та сприйнятливість

Рецептори, що експресуються
Естроген (низький рівень експресії).
Продукція
Глюкозо-6-фосфатаза, активність каналікулярної АТФ-ази (слабка)

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
EMEM (MEM Eagle), w: 2 мМ L-глутамін, w: 2,2 г/л NaHCO3, w: EBSS (цит. номер 820100a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS та 1% NEAA
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Клітини LMH краще прикріплюються до посудин для культивування тканин, попередньо покритих колагеном. Видаліть середовище і промийте прилиплі клітини, використовуючи PBS без кальцію і магнію (3-5 мл PBS для T25, 5-10 мл для T75 флаконів з культурою клітин). Додайте аккутазу (1-2 мл на T25, 2,5 мл на T75), клітинний лист повинен бути повністю покритий. Інкубуйте при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин. Обережно ресуспендуйте клітини середовищем (10 мл), центрифугуйте протягом 3 хвилин при 300 g, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та розподіліть у нові колби, які містять свіже середовище
Щільність висіву
Від 1 до 3 x 104 клітин/см2
Оновлення рідини
Кожні 2 дні
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Порода / підвид
Легорн
Вік донора
16 місяців