LMH

Komórki LMH, pochodzące z męskiego wątrobiaka Leghorn, są wszechstronną linią komórkową szeroko stosowaną w badaniach biologicznych. Tomoyuki Kitagawa stworzył je w 1981 roku w Instytucie Raka w Tokio w Japonii. Komórki te mają fenotyp nabłonkowy i są szczególnie przydatne do badania interakcji gospodarz-patogen w przewodzie pokarmowym drobiu.

Komórki LMH są przylegające i wykazują morfologię podobną do dendrytycznej. Wykazują ekspresję glukozo-6-fosfatazy i słabą aktywność ATPazy kanałowej. Z kariotypem triploidalnym i sześcioma chromosomami markerowymi, komórki te wykazują odrębne cechy genetyczne.
W szczególności wykazano, że komórki LMH skutecznie wspierają syntezę DNA kaczego wirusa zapalenia wątroby typu B (DHBV) po transfekcji konstruktami wirusowymi. Czyni to z nich nieocenione narzędzie do badań wirusologicznych, szczególnie w kontekście infekcji wirusowych związanych z drobiem.
Uzyskanie komórek LMH wiązało się z indukowaniem guzów nowotworowych w wątrobie kurcząt Leghorn poprzez długotrwałe leczenie dietylonitrozoaminą. Komórki te zostały również poddane transformacji chemicznej, co pozwoliło na ich unieśmiertelnienie i ciągłe namnażanie w hodowli.

Pod względem nowotworowości, komórki LMH mają zdolność do tworzenia guzów u atymicznych nagich myszy. Ta cecha czyni je ważnym modelem do badania raka wątrobowokomórkowego. Komórki LMH wykazują ekspresję receptora estrogenowego i mogą być indukowane do ekspresji specyficznego dla wątroby genu apolipoproteiny II (apoII). Wskazuje to na ich udział w szlakach sygnałowych estrogenu i metabolizmie lipidów. Aby hodować komórki LMH, konieczne jest wstępne pokrycie naczyń do hodowli tkankowej kolagenem. Zapewnia to właściwą adhezję i wzrost komórek.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym