Mine otse sisu juurde
LMH
Kude
Maksa
Haigus
Hepatotsellulaarne kartsinoom
Sünonüümid
Leghorn Male Hepatoma cell line

Dokumendid

LMH

Cell line · Toote number 601411

LMH cells, derived from a Leghorn male hepatoma, are a versatile cell line widely used in biological research. Tomoyuki Kitagawa established them in 1981 ...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

LMH rakud, mis on saadud Leghorni isashepatoomist, on bioloogilistes uuringutes laialdaselt kasutatav mitmekülgne rakuliin. Tomoyuki Kitagawa rajas need 1981. aastal Tokyos, Jaapanis asuvas vähiinstituudis. Need rakud on epiteliaalse fenotüübiga ja on eriti kasulikud peremehe ja patogeeni vaheliste interaktsioonide uurimiseks kodulindude seedetraktis.

LMH rakud on kleepuvad ja neil on dendriitide sarnane morfoloogia. Nad ekspresseerivad glükoos-6-fosfataasi ja nõrka kanalilise ATPaasi aktiivsust. Triploidse karüotüübiga ja kuue markerkromosoomiga on neil rakkudel erilised geneetilised omadused.
On näidatud, et LMH rakud toetavad tõhusalt B-hepatiidi viiruse (DHBV) DNA sünteesi, kui neid transfekteeritakse viiruskonstruktsioonidega. See muudab nad hindamatuks vahendiks viroloogiauuringutes, eriti kodulindude viirusnakkuste kontekstis.
LMH-rakkude saamiseks tekitati kanade maksas pikaajalise dietüülnitrosamiiniga töötlemise abil kasvajatest koosnevad sõlmed. Neid rakke on ka keemiliselt muundatud, mis võimaldab nende immortaliseerimist ja pidevat paljundamist kultuuris.

LMH-rakkudel on võime moodustada tuumoreid atüümsetel alasti hiirtel. See omadus teeb neist olulise mudeli hepatotsellulaarse kartsinoomi uurimiseks. LMH rakud ekspresseerivad östrogeeni retseptorit ja neid saab indutseerida ekspresseerima maksaspetsiifilist apolipoproteiin II (apoII) geeni. See viitab nende osalusele östrogeeni signaaliradades ja lipiidide ainevahetuses. LMH-rakkude kasvatamiseks on vaja koekultuuri anumad eelnevalt katta kollageeniga. See tagab rakkude nõuetekohase adhesiivsuse ja kasvu.

Kude
Maksa
Haigus
Hepatotsellulaarne kartsinoom
Rakendused
Rakuliin on kasulik transfektsiooniuuringuteks.
Sünonüümid
  • Leghorn Male Hepatoma cell line

02Klassifikatsioon

Organism
Kana
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadne, dendriitilaadne.
Tuumorigeenne
LMH rakud moodustavad atüümsetel hiirtel kasvajaid.
Karyotüüp
Triploidne, modaalne arv = 116, kuus markerkromosoomi

04Tunnused

Viide
LMH (Cytioni katalooginumber 601411)
NCBI maksukood
9031
Cellosaurus
CVCL_2580

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
Östrogeen (madal ekspressioon).
Tooted
Glükoos-6-fosfataas, kanalilise ATPaasi aktiivsus (nõrk)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
LMH rakud kinnituvad paremini kollageeniga eelnevalt kaetud koekultuuri anumatesse. Eemaldage keskkond ja loputage kinni jäänud rakud, kasutades PBS-i ilma kaltsiumi ja magneesiumita (3-5 ml PBS-i T25, 5-10 ml T75 rakukultuurikolbide puhul). Lisage Accutase (1-2 ml T25, 2,5 ml T75 rakukultuurikolbi kohta), rakukile peab olema täielikult kaetud. Inkubeerige ümbritseval temperatuuril 8-10 minutit. Resuspenseerige rakud ettevaatlikult söötmega (10 ml), tsentrifuugige 3 minutit 300 g juures, resuspenseerige rakud värskes söötmes ja doseerige uutesse kolvidesse, mis sisaldavad värsket söötme
Külvitihedus
1 kuni 3 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
Iga 2 päeva tagant
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
Leghorn
Doonori vanus
16 kuud