Preskoči na vsebino
LMH
Tkivo
Jetra
Bolezen
Hepatocelularni karcinom
Sinonimi
Leghorn Male Hepatoma cell line

Dokumenti

LMH

Cell line · Številka izdelka 601411

LMH cells, derived from a Leghorn male hepatoma, are a versatile cell line widely used in biological research. Tomoyuki Kitagawa established them in 1981 ...

€550.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celice LMH, pridobljene iz hepatoma leghornskega samca, so vsestranska celična linija, ki se pogosto uporablja v bioloških raziskavah. Tomoyuki Kitagawa jih je ustanovil leta 1981 na Inštitutu za raka v Tokiu na Japonskem. Te celice imajo epitelijski fenotip in so še posebej uporabne za preučevanje interakcij med gostiteljem in patogenom v prebavilih perutnine.

Celice LMH so adherentne in imajo dendritom podobno morfologijo. Izražajo glukozo-6-fosfatazo in šibko kanalikularno ATPazno aktivnost. S triploidnim kariotipom in šestimi označevalnimi kromosomi imajo te celice izrazite genetske značilnosti.
Zlasti je bilo dokazano, da celice LMH učinkovito podpirajo sintezo DNA virusa kačjega hepatitisa B (DHBV), ko so transfundirane z virusnimi konstrukti. Zato so neprecenljivo orodje za virološke raziskave, zlasti v okviru virusnih okužb, povezanih s perutnino.
Pri pridobivanju celic LMH je bilo treba z dolgotrajnim zdravljenjem z dietilnitrozaminom povzročiti tumorske vozliče v jetrih piščancev Leghorn. Te celice so bile tudi kemično preoblikovane, kar je omogočilo njihovo nesmrtnost in stalno razmnoževanje v kulturi.

Kar zadeva tumorogenost, so celice LMH sposobne tvoriti tumorje v athimskih golih miših. Zaradi te lastnosti so pomemben model za preučevanje hepatocelularnega karcinoma. Celice LMH izražajo estrogeni receptor in jih je mogoče spodbuditi k izražanju za jetra specifičnega gena apolipoproteina II (apoII). To kaže na njihovo vpletenost v signalne poti estrogena in presnovo lipidov. Za gojenje celic LMH je treba posode za gojenje tkivnih kultur predhodno prekriti s kolagenom. To zagotavlja ustrezno oprijemljivost in rast celic.

Tkivo
Jetra
Bolezen
Hepatocelularni karcinom
Uporaba
Celična linija je uporabna za študije transfekcije.
Sinonimi
  • Leghorn Male Hepatoma cell line

02Razvrstitev

Organizem
Piščanec
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijski, dendritični.
Tumorigeničen
Celice LMH tvorijo tumorje pri atimičnih miših.
Kariotip
Triploidni, modalno število = 116, šest markerskih kromosomov

04Identifikatorji

Navajanje vira
LMH (kataloška številka Cytion 601411)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9031
Cellosaurus
CVCL_2580

05Izražanje in dovzetnost

Izraženi receptorji
Estrogen (nizka stopnja izražanja).
Izdelki
Glukoza-6-fosfataza, kanalikularna ATPazna aktivnost (šibka)

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS in 1 % NEAA
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Celice LMH se bolje pritrdijo na posode tkivnih kultur, ki so bile predhodno prevlečene s kolagenom. Odstranite gojišče in oplaknite prilepljene celice z uporabo PBS brez kalcija in magnezija (3-5 ml PBS za bučke T25, 5-10 ml za bučke T75). Dodajte akutazo (1-2 ml na bučko T25, 2,5 ml na bučko T75), celični list mora biti popolnoma prekrit. Inkubirajte pri sobni temperaturi 8-10 minut. Previdno ponovno suspendirajte celice z gojiščem (10 ml), centrifugirajte 3 minute pri 300 g, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih razdelite v nove bučke s svežim gojiščem
Gostota setve
1 do 3 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
Vsakih 2 dni
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Pasma / podvrsta
Leghorn
Starost darovalca
16 mesecev